基于荧光开启的多巴胺和酪氨酸酶检测研究

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金属纳米材料在过去的几十年里飞速发展,它是指在纳米级的三维空间中具有至少一维或以其为基本单位的金属材料。这些不同维度的纳米材料因其具有较小的尺寸、独特的性质、良好的生物相容性等优势而被应用于各种目标分析物的检测。在本论文中,我们主要采用荧光分析的手段,选用金银纳米簇和二氧化锰纳米片这两种金属纳米材料直接或间接与目标物结合,利用荧光信号的变化构建了多巴胺及酪氨酸酶的高灵敏检测探针。多巴胺(DA)是人体中最重要的神经递质之一,对多巴胺的高灵敏检测一直是一个挑战。本文的第二部分首先合成了牛血清白蛋白稳定的金银纳米团簇(Au-AgNCs)作为荧光材料,引入多巴胺致使纳米簇的荧光显著增强,并伴有荧光发射峰的红移。通过相关的光谱和电化学研究发现荧光增强的现象来源于多巴胺对纳米簇的还原作用,我们利用这一还原导致荧光增强现象对多巴胺进行定量检测。在0.01-1.7μM和1.7-10 μM范围内荧光增强程度和多巴胺浓度分别呈线性关系,检测限为6.9nM。该项研究为多巴胺的测定提供了一种简便、高效的方法,并成功地应用于血清样品的检测。酪氨酸酶(TYR)作为一种黑色素形成过程中重要的限速酶,与雀斑、褐斑或者人体内黑色素过度沉积等疾病的发生有关,近年来在医药、食品、美容等领域的应用引起了广泛的关注。本文的第三部分,利用二氧化锰纳米片与邻苯二胺(OPD)反应可以生成荧光物质二氨基吩嗪(DAP),而多巴胺作为还原剂能对这种反应产生抑制作用;利用酪氨酸酶在氧气存在下对多巴胺的专一性催化,从而实现对酪氨酸酶活性基于荧光开启的检测。实验得到的线性范围在0.006-0.08 U/mL之间,检测限为0.0026 U/mL。该方案有效避免了血清中蛋白质的干扰,具有较好的选择性。
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