背景与目的:颅内动脉瘤的形成机制尚不明确。目前研究认为,颅内动脉瘤的形成和发展与血流动力学异常引起的血管内皮损伤及血管壁重构有关,而其中血管内皮损伤被认为是颅内动脉瘤形成的始动环节。因此深入研究血流动力学引发的血管内皮损伤机制,对明确颅内动脉瘤病因极为重要。PKCα是细胞内重要的信号转导递质,与血管性疾病关系密切。研究表明,在血管内皮细胞中PKCα可以激活NF-κB引发炎症反应参与血管内皮损伤。PKCα还可以通过激活ERK来增强MMPs的表达,加速细胞外基质降解,损伤血管壁。PPARγ是一种血管保护性因子,可以通过降低血管壁炎症反应来减轻血管损伤,在抑制动脉瘤的形成和发展中起重要作用。本课题旨在探讨PKCα和PPARγ之间的相互关系,验证PKCα/ERK/PPARγ/NF-κB信号通路是否在冲击流场作用下参与血管内皮损伤。方法:本研究采用自行设计并改良的T型流室系统来模拟血管分叉处的血流动力学环境,构建血管内皮损伤模型。体外培养脐静脉内皮细胞（HUVEC）及运用RNAi PKCα重组慢病毒转染HUVEC。将上述细胞种植在载玻片上培养,在达到实验条件后置于T型流室系统内。在冲击流场下作用3h、6h后观察内皮细胞密度及形态变化,然后运用Westren Blot检测PKCα、p-PKCα、ERK、p-ERK、PPARγ、NF-κB和MMP2等蛋白的变化情况。结果:1.冲击流场作用下内皮细胞密度及形态变化情况:1区:细胞的密度及形态无明显变化,细胞仍维持融合状态;2区:在高壁面剪切力作用下,细胞的密度明显下降,细胞间间隙拉大,细胞形态多样伴拉长,随着作用时间延长（3h-6h）变化明显。3区:细胞的密度增加,连接紧密。2.冲击流场作用下内皮细胞中PKCα激活及PPARγ、NF-κB、MMP2的表达情况:冲击流场下作用6h后p-PKCα、NF-κB、MMP2表达显著增加（P<0.05）,作用3h和6h后PPARγ表达显著减少（P<0.05）;运用Ca2+抑制剂处理后p-PKCα表达未见明显变化（P>0.05）。3.冲击流场作用下内皮细胞中ERK/NF-κB激活情况:冲击流场下作用6h后p-ERK、NF-κB、MMP2表达显著增加（P<0.05）;运用ERK抑制剂后NF-κB、MMP2表达增加受到阻断（P<0.05）;运用P38抑制剂或PI3K/Akt抑制后对NF-κB、MMP2表达增加阻断不明显（P>0.05）。4.冲击流场作用下内皮细胞中PKCα对ERK、NF-κB及MMP2的影响:在冲击流场下作用6h后,正常内皮细胞组中p-ERK、NF-κB、MMP2表达显著增加（P<0.05）;PKCα敲除组内皮细胞中p-ERK、NF-κB、MMP2表达未见明显变化（P>0.05）。5.冲击流场作用下内皮细胞中PPARγ对NF-κB和MMP2的影响:在冲击流场下作用6h后,正常内皮细胞组中PPARγ表达显著减少（P<0.05）,NF-κB和MMP2表达显著增加（P<0.05）;PPARγ激动剂预处理组内皮细胞中NF-κB、MMP2表达未见明显变化（P>0.05）。结论:在冲击流场作用下,PKCα在Ca2+作用下发生激活后进一步激活ERK,激活的ERK可以直接或以抑制PPARγ的间接的方式,使NF-κB和MMP2表达增加,促进血管内皮炎症和细胞外基质降解,参与血管内皮损伤。因此,我们认为PKCα/ERK/PPARγ/NF-κB信号通路激活参与冲击流作用下血管内皮损伤,该通路可能是颅内动脉瘤的形成机制之一。