蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株诱导凋亡和抗增殖作用的实验研究

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:supxch
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株诱导凋亡和抗增殖作用及其机制,为开发抗肿瘤新中药提供实验依据。方法:应用MTT法测定蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株的生长抑制作用;通过倒置显微镜、光学显微镜、吖碇橙(AO)/溴化乙啶(EB)染色荧光显微镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞仪检测A549细胞的周期分布相和细胞凋亡率;应用免疫细胞化学技术检测药物处理前后增殖细胞核抗原Ki-67及凋亡相关蛋白酶Caspase3、8、9及凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达。结果:(1)MTT法检测结果,蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株有明显的抑制生长的作用,且呈现出浓度的依赖性:(2)倒置显微镜观察结果,实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;(3)HE染色观察结果,实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或染色质块形成,有的细胞膜起泡形成凋亡小体;(4)AO/EB荧光染色观察结果,实验组肿瘤细胞核染色质呈橘红色,胞质内的橘红色或橘黄色荧光消失,细胞周围可见亮绿色的凋亡小体;(5)流式细胞仪检测结果显示:蝙蝠葛活性成分可以诱导A549细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰,并且G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.01),而S期和G2/M期细胞比例则明显下降,将细胞阻滞在G0/G1期;(6)免疫细胞化学ki-67抗原检测结果,蝙蝠葛活性成分作用后ki-67阳性表达率随药物浓度的提高和作用时间的延长而降低,表现出浓度的依赖性关系;凋亡相关基因表达检测结果,实验组Bcl-2基因蛋白阳性表达率明显降低,加药组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3表达增加,与对照组相比较均有显著差异(P<0.01)。结论:1.蝙蝠葛活性成分在体外对人肺癌A549细胞株有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用。2.蝙蝠葛活性成分抑制增殖作用机制可能与下调ki-67蛋白表达,细胞周期发生G0/G1期阻滞有关。3.蝙蝠葛活性成分诱导凋亡作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达,上调Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达,经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行。4.蝙蝠葛活性成分具有显著的体外抗肿瘤作用,有望开发成一种新的抗肿瘤药物。
其他文献
通过观察食管癌细胞经过X线照射后不同时间点DNA修复基因的表达变化,探讨这些DNA修复基因在放射抵抗形成中的作用。食管癌亲代细胞系Seg-1经放射线反复照射(2Gy/次,总剂量达
研究目的:本研究旨在观察: 1)平调饮对原发性肝癌患者AFPmRNA,GPC-3mRNA的影响2)平调饮对原发性肝癌患者肝脏功能的影响3)平调饮对原发性肝癌患者生存质量的改善。研究方法:
近年来跆拳道竞赛规则进行了较大的修改,本文通过对跆拳道新旧规则条款的对比分析,结合新规则实施对比赛的影响进行探讨,以期能为广大教练员提供科学合理的训练手段和方法。
目的:腮腺区肿瘤大多数生长缓慢,临床上难以估计其良恶性。本研究拟通过对腮腺肿瘤的computer tomography(CT)征象的分析,以提高CT对腮腺肿瘤的诊断准确率。方法:回顾性分析
<正> 关于刑事诉讼证据的特征问题,论者颇多,其中有一种观点认为,刑事诉讼证据只具有客观真实性和与案件的相关性这两个基本特征,而不承认能够证明案件的真实情况,是证据的重
西米替丁(cimetidine,CMD)是一种强效组织胺H2受体阻断剂,在药理学上具有抑制胃酸分泌、调节免疫、抗病毒、抗雄激素等作用。最开始,西米替丁被应用于治疗十二指肠溃疡、胃溃
目的研究分析食管癌切除术后患者的临床护理方法及效果。方法整理我院在2010年8月至2011年8月间收治的食管癌切除术患者的临床护理资料,对患者的护理方法、效果等进行分析总
研制用于合成葡萄糖酸—δ—内酯的钯碳催化剂,提出了合成该化合物的最佳配方,讨论了合成过程中存在的问题。