肝硬化门脉高压症脾亢患者铁代谢紊乱及其促进肝硬化的作用机制

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目的:通过检测肝硬化门脉高压症脾亢患者肝脾组织铁含量、肝组织转铁蛋白受体在蛋白及基因水平的表达情况和血中肿瘤坏死因子-α的表达,来初步探讨不同程度脾功能亢进(脾亢)的肝硬化门脉高压症脾亢患者铁代谢紊乱及其促进肝硬化的作用机制。方法:实验分组:健康对照组、轻度脾亢组、中度脾亢组和重度脾亢组;各组术前术后自身对照。采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测转铁蛋白受体(TfR)在基因水平和蛋白水平的表达;原子吸收分光光度计法测量脾组织、肝组织铁的含量; ELISA法检测肝硬化脾亢患者外周静脉血肝硬化相关细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。应用SPSS 13.0医学统计软件分析各基因及蛋白表达的差异及相关性。结果:肝脾组织铁含量组间比较三组肝硬化组均大于对照组,结果有显著差异(P<0.05);轻度与中度脾亢组比较脾脏铁含量差异无显著性(P>0.05),可能与病例数过少有关,其余各组间铁含量比较均有显著差异(P<0.05);肝组织铁含量随脾亢程度加重铁含量随之增加(P<0.05),脾组织铁含量升高与肝组织铁含量升高存在明显相关性(相关系数r=0.741,P<0.01);RT-PCR结果显示各组间TfR mRNA表达水平结果均有统计学意义(P<0.05),TfR mRNA的表达脾亢组均高于正常对照组,三组脾亢组之间随脾亢程度的加深,TfR mRNA表达依次增加(P<0.05);脾亢三组肝组织免疫组织化学染色结果TfR蛋白表达均大于正常对照组;脾亢三组之间比较面密度未见明显改变(P>0.05),而平均灰度明显降低,差异有显著性(P<0.05),积分光密度明显升高,差异有显著性(P<0.05);血标本肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量组间比较结果各组之间差异均有显著意义(P<0.05),肝硬化门脉高压症三组样本均高于正常组,并且门脉高压症脾亢三组随脾亢程度的加重,肿瘤坏死因子(TNF-α)吸光度依次增加(P<0.05)。脾亢组术前术后比较均有统计学意义(P<0.05)。外周血TNF-α表达升高与肝脾组织铁含量升高存在明显正相关性(P<0.01)。结论:肝硬化门脉高压症脾亢患者功能亢进的脾脏导致肝脏铁过载及肝损伤;铁过载引起TNF-α的表达升高,引起肝纤维化及硬化;本研究结果支持早期切除中、重度脾亢患者脾脏的观点。
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