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目的:盆腔器官脱垂(POP)是一个全球性健康问题,影响着各个年龄组的成年妇女。它大大降低了她们的生活质量。然而其具体发病机制尚不清楚。目前多认为POP的病理生理与盆腔器官支持组织的老化和缺陷有关,而线粒体功能异常对支持组织的老化起主要作用。研究发现体细胞的线粒体DNA(mtDNA)突变和氧化损伤的累积是组织衰老的重要贡献者。也有研究认为在没有氧化应激的情况下,单独的mtDNA突变可以通过诱导细胞凋亡而使组织过早老化。此外,mtDNA的突变会影响电子传递链中线粒体相关酶类的合成和代谢,使线粒体功能障碍,以致组织薄弱。因此本研究旨在通过检测POP和非POP患者外周血和盆底不同组织中总mtDNA及存在4977bp缺失的mtDNA(mtDNA4977)的含量变化来了解mtDNA的变化与POP发生发展之间的关联,期望在预防和治疗POP方面探求新的思路。方法:我们选取2009年1月和2010年10月期间就诊于河北医科大学第二医院妇产科的行子宫全切术的患者,将26名POP患者(Ⅰ–Ⅲ期)作为研究组,21名患有妇科良性疾病的非POP患者(0期)作为对照组。合并心脏病、糖尿病、神经退行性疾病、恶性肿瘤或先前有盆腔放射史的妇女以及近期接受过雌孕激素治疗的患者均被排除在外。两组患者在年龄、产次、体重指数(BMI)、绝经和剖宫产史方面具有可比性(P>0.05)。经医院伦理委员会认同且获得患者的知情同意后,我们留取所有患者的外周血以及骶韧带和(或)阴道前后壁组织,经液氮速冻后保存于?80°C冰箱中直到DNA提取时。用血液基因组和动物组织基因组提取试剂盒分别提取患者外周血和不同盆底组织的整个细胞DNA。然后采用实时定量PCR(Real-time PCR)法检测外周血、骶韧带、阴道前后壁组织中总mtDNA和mtDNA4977的含量,其结果用所得到的相对定量值(RQ值)表示。采用SPSS13.0统计软件包,对所得数据进行统计分析。研究组和对照组间相应的基本特性用适用于连续变量的非参数t检验/ Mann–Whitney U检验来检测。绝经期和剖宫产百分比应用卡方检验来评估。用Spearman等级相关来观察两个连续变量间的关系。以均数±标准差(x±s)表示,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1两组患者的一般情况在年龄、BMI、绝经和剖宫产史方面研究组和对照组间无显著差异(P>0.05),说明两组资料具有可比性。而在产次方面,研究组明显高于对照组(P<0.05),表明多产是发生POP的一个决定性因素。2两组患者外周血和不同盆底组织中mtDNA和mtDNA4977的含量mtDNA在子宫骶韧带中的含量,POP组(0.815±0.516)明显低于非POP组(2.215±1.414),差异有统计学意义(P<0.05);而mtDNA在POP患者的外周血、阴道前壁和后壁中的含量(分别为1.187±1.306, 0.955±0.701, 0.883±0.949),与非POP组(分别为1.466±1.111, 0.953±0.688, 0.798±0.478)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。mtDNA4977在POP患者的外周血、子宫骶韧带以及阴道前、后壁中的含量(分别为3.488±4.100, 6.181±8.408, 6.903±7.293, 8.300±8.594)均显著高于非POP患者(分别为1.077±0.895, 0.875±0.877, 1.149±1.173, 1.031±0.720),差异有统计学意义(P<0.05)。无论POP组还是非POP组,mtDNA和mtDNA4977的含量在阴道前壁和后壁之间均无显著差异(P>0.05)。随着POP程度的不断加重(对0到Ⅲ期POP进行分析),我们发现在骶韧带中mtDNA拷贝量呈明显下降趋势(P<0.05),而在外周血、阴道前壁和后壁中此趋势不明显(P>0.05);相反,随着POP程度的加重(0到III期),在外周血、骶韧带、阴道前壁和后壁中mtDNA4977的比例却显著增加(P<0.05)。3相关性分析POP患者外周血、骶韧带以及阴道壁中mtDNA和mtDNA4977含量之间均无明显相关性(r= 0.236、-0.371、0.062, P>0.05)。mtDNA在POP患者外周血和骶韧带之间呈正相关(r=0.627, P<0.05),而mtDNA4977在POP患者外周血和骶韧带之间无显著相关性(r=-0.067, P>0.05)。结论:1 POP患者骶韧带组织中mtDNA含量较非POP患者明显降低,且这种趋势随着POP程度的加重而更加突出。提示骶韧带组织中mtDNA含量下降可能与POP的发病有关。2 POP患者外周血、骶韧带和阴道前后壁组织中mtDNA4977的累积比例较非POP患者均明显增高,且随着POP程度的加重而更加明显。这提示外周血和盆底组织中mtDNA4977的累积是POP发生和发展过程中的一个分子事件。3 POP患者骶韧带中同时存在mtDNA消耗和mtDNA4977累积,表明骶韧带的损伤与POP的关系更密切,其作为盆底的主要支持力量不容忽视。