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肺炎的防治是各国政府、医学科研人员及临床医护人员需要面对的严峻问题之一。缺乏快速、简便的鉴定肺炎病原和监测抗生素疗效的方法是影响肺炎防治的一个关键因素。在缺乏确切病因证据的情况下,仅凭经验和少数临床检验指标而使用抗生素治疗肺炎的情况普遍存在,这导致了抗生素滥用和耐药菌的出现。近年,虽然有少量研究表明中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（Neutrophil gelatinase-associatedlipocalin,NGAL）具有区分细菌性感染和病毒性感染的能力,但是NGAL用作细菌标志物有待进一步验证和深入研究。急性细菌感染能导致中性粒细胞活化并释放预存在第二颗粒中的同二聚体NGAL。因此,本论文以儿童社区获得性肺炎（Community-acquiredpneumonia,CAP）为研究队列,对同源二聚体NGAL用作急性细菌感染生物标志物的可能性进行了研究。为了能特异性定量同源二聚体NGAL,本论文首先建立了捕获和检测抗体均为同一单克隆抗体的夹心ELISA。随后,通过分析同源二聚体NGAL在细菌性CAP、病毒性CAP及健康儿童血清样本中的浓度以及NGAL与PCT、CRP及中性粒细胞数等临床细菌感染指标的相关性,评估了同源二聚体NGAL用于区分诊断细菌性CAP和病毒性CAP的能力。主要研究内容和结果如下:1.建立了同源二聚体NGAL定量方法与单体或异二聚体相比,同源二聚体NGAL分子存在相同抗原表位。根据这一特征,本论文利用前期筛选得到的同一株单克隆抗体作为捕获抗体和检测抗体,建立了特异性检测同源二聚体NGAL的夹心ELISA。利用棋盘法确定了包被抗体浓度（1 μg/mL）和检测抗体的浓度（1:5000）,并进行了 ELISA方法学研究,最终建立了同二聚体NGAL的特异性免疫定量方法。具体方法学参数如下:线性范围为0.1～6.4 μg/L（R2>0.99、范围为0.99～1.0）,最低检测限为0.045μg/L（0.032～0.054 μg/L）,平均批内和批间差异（CV）分别为7.63%（1.42%～18.10%）和12.6%（7.37%～23.23%）,对同源二聚体的平均回收率为99.25%（81.35%～119.11%）而对单体和异二聚体的平均回收率分别为6.79%（5.40%～8.64%）和5.68%（4.20%～9.62%）,梯度稀释研究结果显示无明显差距。上述数据表明,本论文所建立的NGAL同源二聚体定量方法具有良好的特异性和重复性,可用于后续论文研究工作。2.同源二聚体NGAL具有用作儿童细菌性肺炎诊断标志物的能力本论文选择儿童CAP患者为研究对象,通过分析细菌性CAP（133例）、病毒性CAP（65例）及健康对照组（47例）血清中同源二聚体NGAL的浓度与其他细菌感染标志物（PCT、CRP及中性粒细胞数）的相关性,较详细地评估同源二聚体NGAL用于区分急性细菌性感染和病毒性感染的能力。结果显示:（1）细菌性肺炎组同源二聚体NGAL水平（算术平均数±SD,73.25±52.68 μg/L）显著高于病毒性肺炎组（22.63±14.47 μg/L）和健康组（15.54±9.11 μg/L）,P值均小于0.0001。（2）在细菌性CAP组,NGAL与PCT、CRP及中性粒细胞数均具有显著相关性,R值分别为0.699、0.566及0.590;而在病毒性CAP组和健康对照组中,上述生物标志物之间的相关性显著降低。（3）NGAL用于区分细菌性肺炎和正常对照组的受试者工作特征曲线下面积（AU-ROC）值为0.94（95%CI=0.89～0.97）;用于区分细菌性CAP和病毒性CAP的AU-ROC值为0.86（0.80～0.91）;用于区分细菌性CAP和非细菌性感染组的AU-ROC值为0.90（0.85～0.93）。此外,上述NGAL区分诊断的AU-ROC值均显著高于其他三种标志物对应的AU-ROC值。以上数据表明同源二聚体NGAL能区分细菌性和病毒性CAP,是良好的细菌感染标志物。综上,本论文建立了同源二聚体NGAL的特异性定量方法;初步证实,同源二聚体NGAL具有区分诊断细菌性肺炎和病毒性肺炎的能力。论文研究可为将来基于NGAL的急性感染性疾病的病因区分性诊断和指导医生科学使用抗生素提供理论基础和技术手段。