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Micro RNAs（mi RNAs）是一类长度约22 nt的单链内源性非编码RNA,通过与靶基因的3′UTR结合,调控靶基因的表达,进而参与调控细胞增殖、迁移和分化的过程。前人研究结果证明,mi R-186-5p参与包括细胞增殖与凋亡等在内的众多的生物学过程。而关于mi R-186-5p在猪前体脂肪细胞增殖分化过程中的作用及具体机制目前尚不清楚。研究mi R-186-5p在猪前体脂肪细胞增殖分化过程中的作用及具体机制能为进一步揭示mi R-186-5p调控猪脂肪沉积的机理提供理论依据。为了探究mi R-186-5p在猪前体脂肪细胞增殖分化过程中的作用及具体机制,本试验首先采取8日龄仔猪的背部和颈部皮下脂肪组织,采用胶原酶消化法分离猪原代前体脂肪细胞,采用MTT法、CCK8法以及划痕实验检测mi R-186-5p对猪前体脂肪细胞增殖和迁移的影响,油红O染色法及甘油三酯含量检测观察mi R-186-5p对猪前体脂肪细胞诱导后脂滴生成情况的影响,q PCR法检测猪前体脂肪细胞增殖分化过程中相关基因的m RNA表达水平,并采用双荧光素酶活性检测鉴定mi R-186-5p与靶基因的靶向关系。试验结果如下:1.转染mi R-186-5p mimics（模拟物）和inhibitor（抑制物）后,用MTT法检测72h时细胞的增殖情况,发现mimics组细胞生长活力显著下降（P<0.05）,inhibitor组细胞生长活力显著上升（P<0.05）;用CCK8法检测不同时间点mi R-186-5p对前体脂肪细胞增殖的影响,结果与MTT试验结果一致,24 h、48 h和72 h时,mimics组细胞生长被极显著抑制（P<0.01）,而inhibitor组细胞生长被显著促进（P<0.05）;划痕实验结果与此结果一致;q PCR结果显示mimics组细胞增殖相关基因PCNA和CDK4的表达极显著下降（P<0.01）,而inhibitor组PCNA和CDK4的表达极显著上升（P<0.01）。结果表明mi R-186-5p能抑制猪前体脂肪细胞的增殖和迁移。2.转染mi R-186-5p mimics和inhibitor后,诱导前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化,发现mimics组细胞内甘油三酯含量与脂滴数明显增多,成脂相关基因PPARγ、SREBF1、C/EBPβ、FABP4、LPL的m RNA表达极显著升高（P<0.01）,inhibitor组结果则相反,说明mi R-186-5p能抑制猪前体脂肪细胞分化。3.q PCR结果显示,过表达mi R-186-5p组SIRT2表达极显著下降（P<0.01）,抑制mi R-186-5p后SIRT2表达极显著上升（P<0.01）。双荧光素酶报告载体活性研究发现,过表达mi R-186-5p后能显著抑制SIRT2野生型荧光素酶报告载体的活性。从上述实验结果推测mi R-186-5p对猪前体脂肪细胞的作用一定程度上是通过调控SIRT2的表达实现的。综上所述,本研究系统的分析了mi R-186-5p对猪前体脂肪细胞增殖、迁移和分化的调控,最终证明了mi R-186-5p能够抑制猪前体脂肪细胞增殖、迁移,促进其分化。该研究结果为研究mi RNAs调控猪脂肪发育进而改善猪肉品质提供了理论依据。