反式-2-己烯醛对松材线虫生长、繁殖和行为的影响

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松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)是一种世界范围内的检疫性害虫,是松树枯萎病(Pine Wilt Disease)的病原,它给木材以及木制品输出国造成巨大的经济损失。目前,该病的防治和控制工作进展缓慢,关键技术层面难以取得实质性的突破,且一些传统的杀线剂对人类的健康和环境造成严重的威胁,所以一种低毒、高效杀线剂的研发迫在眉睫。反式-2-己烯醛又称青叶醛,是一种6碳(C6)挥发性化合物,在自然界中广泛存在,它天然存在于许多蔬菜、水果中。此外,反式-2-己烯醛具有极强的香气,因此通常被用作人造香料和食品添加剂。据报道,反式-2-己烯醛对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和小麦孢囊线虫(Heterodera avenae)具有较强的抑制活性,但其杀线活性的作用机理尚不清楚。本研究主要针对反式-2-己烯醛对松材线虫生长发育、繁殖能力、运动行为及呼吸作用的影响及对其防治效果做了初步的研究,为反式-2-己烯醛的杀线机理探究奠定一定的理论基础。研究结果具体如下:1.反式-2-己烯醛熏蒸黑松原木对松材线虫的防治效果试验结果表明,在实验室25℃条件下,用反式-2-己烯醛(99%纯品)对黑松原木进行熏蒸处理,熏蒸目标剂量浓度分别为:139.8 g m-3,349.5 g m-3和699 g m-3,松材线虫的死亡率从63.6%达到100%。2.反式-2-己烯醛对不同龄期松材线虫的致死效应反式-2-己烯醛对松材线虫的L2s,L3s和L4s/成虫具有显著的杀线活性,其中L2s最为敏感,其LC50值为11.2μg m L-1。3.反式-2-己烯醛对松材线虫胚胎发育的影响试验证明,反式-2-己烯醛严重影响松材线虫的胚胎发育,它明显抑制线虫卵的孵化。剂量为200μg m L-1的反式-2-己烯处理线虫卵12 h时,松材线虫的卵孵化率仅为20.0%。4.反式-2-己烯醛对松材线虫繁殖能力的影响反式-2-己烯醛抑制松材线虫的繁殖,主要体现在减少线虫的种群数量,抑制其繁殖速率,减少其产卵量:反式-2-己烯醛处理组(即36和55μg m L-1)的种群数量分别为11×104和8.3×104条,明显低于溶剂对照组和空白对照组的种群数量;反式-2-己烯醛对松材线虫繁殖速率影响的结果显示,空白对照组和溶剂对照组具有较高的繁殖速率,分别为7.6×103和7.25×103,反式-2-己烯醛在剂量为36μg m L-1时繁殖速率(5.5×103)为中等,而剂量为55μg m L-1时表现出最慢的繁殖速率(4.15×103)。在36和55μg m L-1两个浓度下处理线虫24 h,84 h后,松材线虫单条雌虫的平均产卵量分别为15±0.5657和15.5±0.0707个,与溶剂对照(19.4±0.2828个卵)和空白对照的产卵量(21.3±0.2357个卵)具有显著性差异。5.反式-2-己烯醛对连续2代松材线虫体长和雌雄性别比例的影响子一代(F1)的松材线虫,36μg m L-1的反式-2-己烯醛处理组的雌虫体长为992.4±0.605μm,55μg m L-1剂量下雌虫体长为966.0±10.61μm,明显短于溶剂对照组雌虫(1048.7±0.257μm)和空白对照组雌虫(1085.7±3.779μm)的体长。另外,在55μg m L-1剂量下雄虫体长为849.1±9.878μm,明显短于溶剂对照组(983.3±0.7464μm)和空白对照组(1024.1±2.0916μm)中雄虫体长。进一步试验表明,子二代(F2)中线虫的体长在处理组和对照组之间没有显著差异,在本试验测定的两代线虫中,雌性线虫的体长明显长于雄性线虫。本试验还测定了后代雌雄线虫的性别比例,结果表明,松材线虫用反式-2-己烯醛处理后后,其第2代(F1)和第3代(F2)的雌雄线虫性别比例均无显著差异。6.反式-2-己烯醛对松材线虫运动行为的影响经反式-2-己烯醛处理后,松材线虫的身体摆动频率降低,线虫虫体表现出异常扭曲情况,主要表现为螺旋卷曲或多重卷曲。结果表明,经高浓度的反式-2-己烯醛(100和80μg m L-1)处理后的线虫在前30 min表现为100%异常,与对照组存在显著差异;30 min后,一部分存活的线虫运动行为逐渐恢复正常。7.反式-2-己烯醛对松材线虫呼吸作用的影响反式-2-己烯醛对松材线虫的呼吸速率影响呈现出先升高后降低的趋势。试验结果表明,前5 h,处理组中线虫的呼吸速率高于对照中线虫的呼吸速率;5 h后呼吸速率逐渐下降;第8 h时,处理组的呼吸速率与溶剂对照组基本相同;第10 h,处理组线虫的呼吸速率明显低于溶剂对照组。综上所述,反式-2-己烯醛对松材线虫具有较强的杀线活性,且本研究为确认反式-2-己烯醛对植物寄生线虫的作用方式以及致病机理的研究提供了理论基础。
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