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背景:妊娠期肥胖正在成为一个日益严重的公共卫生问题。肥胖不仅影响着母体健康,而且对后代近期和远期都有不利的影响。肥胖母亲在围产期发生早产、新生儿畸形、胎儿窘迫和围产儿死亡的风险明显升高。母亲肥胖也是后代儿童期和成年期发生肥胖和代谢紊乱的重要危险因素,但其发病机制尚存在争议。疾病的“发育起源学说”(Developmental origins of health and disease,DOHaD)近年来受到越来越多的关注。最新的观点认为个体成年后的代谢模式可能在婴儿期甚至胎儿期就已经受到了宫内营养环境的影响。肥胖孕妇营养过剩的子宫内环境能对胚胎期重要器官的发育造成影响,从而增加其子代成年后多种慢性疾病如肥胖、高脂血症和糖尿病等的发病风险。因此,研究母体肥胖对子代脂质代谢紊乱的影响,揭示其发生发展的分子机制,对于慢性病的早期防控具有重要意义。最近的研究发现长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA)参与了慢性代谢性疾病的发生发展。LncRNA是一类转录本长度超过200nt的单链RNA分子,由于缺乏开放阅读框而不具备任何编码蛋白的功能,既往被认为是“垃圾基因”。然而近年来研究表明LncRNA参与了多种生理病理进程。其中,LncRNA调节改变与母体肥胖导致的子代“代谢重组”的关联尚不清楚。因此,本研究旨在阐明潜在的脂质代谢相关LncRNA在子代肝脏代谢的作用,并确定相关信号途径。方法:本研究采用雌性C57/BL6小鼠建立动物模型。肥胖组母鼠通过高脂饲料喂食10周诱导母体肥胖(能量的45%来自于脂肪),对照小鼠喂食标准饲料(能量的15%来自于脂肪)。喂养10周后,母鼠与健康雄鼠按2:1比例交配,所有母鼠自由分娩。子代出生后3周断奶,喂食标准饲料。每周监测母鼠和子代体重。分别在子代3周龄和8周龄监测血糖和血脂。由于子代出生后前3周是母乳喂养,子代在胎儿期和出生后3周内所有的营养摄入均来自于母亲,因此为了排除其他因素,关注母体肥胖对子代肝脏脂质代谢通路的影响,在3周龄时对雌性子代肝脏进行RNA转录组测序分析。用R语言和SPSS 22.0对测序数据进行生物信息学分析,分析子代肝脏组织LncRNA的表达谱,筛选差异性LncRNA。通过在线网站预测LncRNA的下游靶标,并分析LncRNA-miRNA-mRNA网络关系。应用Gene Ontology(GO)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)进行下游靶标的生物学功能和富集通路分析。通过实时荧光定量PCR验证LncRNA和下游靶标在子代肝脏组织中的表达。在小鼠肝细胞系AML12细胞中,通过SiRNA技术分别干扰LncRNA和下游microRNA,实时荧光定量PCR和油红O染色,验证LncRNA和下游靶标的的功能。结果:相对于对照组母鼠子代,肥胖母鼠的子代出现低出生体重,肥胖母鼠雌性子代在出生后8周内出现超重趋势。肥胖母鼠雌性子代8周龄时甘油三酯水平高于对照组雌性子代。我们从总RNA文库中识别出4393个LncRNA,3226为已知基因,1167个为未知基因。所识别的LncRNA的基因组位点广泛分布在除Y染色体之外的染色体上。通过DEseq差异性分析,我们发现了37个上调和47个下调的已知LncRNA。根据差异性得分,筛选出了LncRNA Lockd为表达差异最大的基因。LncRNA Lockd定位于细胞胞浆,位于6号染色体。通过在线网站预测LncRNA Lockd的下游靶标为miR-582-5p,miR-582-5p的下游靶标为Elovl5。功能富集分析显示“脂肪酸代谢”是最显著富集的途径并且与脂质代谢相关。通过实验验证,在肥胖雌性子代中观察到LncRNA Lockd和Elovl5表达下调,miR-582-5p表达上调。采用0.1mmol/L棕榈酸(Palmitic acid,PA)处理小鼠肝细胞系AML12细胞24h,体外模拟肝脏脂质沉积。采用SiRNA对LncRNA Lockd干扰,miR-582-5p表达上调,Elovl5表达下调,细胞脂质沉积增加。采用SiRNA对miR-582-5p干扰,LncRNA Lockd表达未受到影响,Elovl5表达上调,细胞脂质沉积减少。结论:LncRNA Lockd可能是母体肥胖引起的子代肝脏脂质代谢紊乱中的关键基因,LncRNA Lockd作为内源性RNA与Elovl5竞争性结合miR-582-5p,从而导致子代肝脏脂质沉积。