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目的:定志小丸最早收载于《备急千金要方》,由人参、茯苓、远志、石菖蒲四味药按照质量比3:3:2:2组成。整方配伍合理、组方精妙,为中医治疗阿尔茨海默病的基础方剂,临床沿用至今[1]。该组方中人参和远志均具有宁心安神,益智强志的作用,其中人参为“君药”,远志为“臣药”,人参皂苷及远志皂苷类化合物为人参和远志主要活性成分,但皂苷类成分口服生物利用度低,单独用药往往难以被胃肠吸收到达靶器官从而发挥疗效[2-3]。定志小丸中石菖蒲具有祛痰开窍,化湿开胃的功效,配伍使用时可促进其他成分的体内吸收,在该方中用作“使药”。课题组前期研究证实石菖蒲能够促进定志小丸中人参皂苷类成分的肠吸收,由于阿尔茨海默病是脑部疾病,石菖蒲能否使皂苷类成分具有“脑靶向”特性达到靶器官值得深入研究。本论文从促进“脑靶向”角度探究使药石菖蒲对定志小丸中5种皂苷类成分的影响,为该方临床用药提供科学依据,同时为复方配伍研究提供借鉴。方法:1、小鼠灌胃定志小丸全方及缺石菖蒲方（不同配比石菖蒲）,采用超高效液相色谱-电喷雾离子源-质谱串联法（UHPLC-ESI-MS/MS）检测小鼠血浆及脑匀浆中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及细叶远志皂苷浓度,DAS2.0软件拟合小鼠药动学参数,比较定志小丸全方和缺石菖蒲方中五种皂苷类成分AUC0-t、Cmax、t1/2等药动学参数。计算脑相对摄取率Re、浓度比Ce和靶向指数DTI,评价石菖蒲对五种皂苷类成分“脑靶向性”的影响。2、小鼠灌胃不同浓度的石菖蒲挥发油及维拉帕米后,再灌胃相同剂量的P-gp底物罗丹明123,采用荧光分光光度法检测小鼠血浆、脑组织中罗丹明123含量,考察石菖蒲挥发油对罗丹明123在小鼠体内吸收的影响,评价石菖蒲挥发油对P-gp外排作用的影响。3、小鼠灌胃不同浓度的石菖蒲挥发油及维拉帕米后,采用Western blot法检测小鼠空肠和脑组织中P-gp表达,考察石菖蒲挥发油对小鼠空肠和脑组织中P-gp表达的影响;运用分子对接软件对石菖蒲挥发油41种小分子与P-gp进行分子对接打分,虚拟评价石菖蒲挥发油中成分对P-gp的影响。结果:1、与缺石菖蒲方比较,小鼠血浆中,定志小丸全方组的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及细叶远志皂苷的AUC0-t较缺石菖蒲方,分别增加了165.5%,237.5%,225.9%,248.8%和238.4%（P<0.05）,Cmax分别增加了160.9%,139.5%,216.7%,250.4%和223.6%（P<0.05）;t1/2为缺石菖蒲方组的3.09、2.57、1.67、1.76和2.43倍（P<0.05）,MRT0-∞为缺石菖蒲方组的1.35、1.19、2.13、2.56和2.44倍（P<0.05）;小鼠脑组织中,定志小丸全方组的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及细叶远志皂苷的AUC0-t分别是缺石菖蒲方组的5.57、3.84、3.30、4.20和4.10倍（P<0.05）;Cmax分别是缺石菖蒲方组的2.25、1.45、2.16、2.28和2.30倍（P<0.05）;t1/2和MRT0-∞较缺石菖蒲方组也明显增加（P<0.05）。人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及细叶远志皂苷的DTI分别为2.10、1.14、1.01、1.20及1.21。结果表明石菖蒲能够促进5种皂苷类成分体内吸收,且呈浓度依赖性,同时石菖蒲使5种皂苷类具有一定的脑靶向作用。2、小鼠灌胃不同剂量的石菖蒲挥发油及维拉帕米,1 h后,中剂量挥发油、高剂量挥发油组及维拉帕米组血浆和脑组织中罗丹明123累积量均明显高于空白对照组（P<0.05）,Kp值为空白对照组的1.36、1.48及1.21倍（P<0.05）;灌胃2 h后,中剂量挥发油、高剂量挥发油组及维拉帕米组的Kp值为空白对照组的1.79、2.24、和1.66倍（P<0.05）。结果表明,石菖蒲挥发油能够增加罗丹明123在小鼠体内累积量,且呈剂量依赖性,提示石菖蒲挥发油可通过抑制P-gp外排促进药物吸收。3、较空白对照组,石菖蒲挥发油组能显著降低小鼠空肠和脑组织海马区P-gp的表达量（P<0.05）,说明石菖蒲挥发油能够抑制P-gp的表达;基于分子对接打分情况来看,β-细辛醚,α-细辛醚和（Z,Z）-9,12-十八烷二烯酸结合情况较好,结合打分分别为-15.2863,-13.1868和-13.0812,它们主要通过共轭双键以及氢键与P-gp结合位点进行结合。结论:1、石菖蒲挥发油能够促进定志小丸中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及细叶远志皂苷在小鼠体内的吸收,呈浓度依赖性;同时,石菖蒲对五种皂苷类成分具有一定脑靶向性作用;2、石菖蒲挥发油能够增加小鼠体内P-gp底物罗丹明123的累积量,提示石菖蒲促吸收作用可能与抑制P-gp有关;3、石菖蒲挥发油能够抑制小鼠空肠和海马区P-gp的表达,提示抑制P-gp的表达可能是石菖蒲促进皂苷类成分体内吸收的主要原因之一。