论文部分内容阅读
草莓是无性繁殖的多年生草本植物，容易受到病毒的侵染，病毒病对草莓生产危害严重。本研究旨在优化草莓镶脉病毒的PCR检测体系，并利用PCR检测病毒技术研究草莓病毒的脱除方法和效率，主要结果如下：
1.利用改进CTAB法从草莓叶片中提取出优质的总DNA，可以稳定地对草莓植株中的SVBV进行检测。
2.对PCR检测草莓植株中SVBV的反应体系进行了优化。
3.20μLPCR反应液中包含0.001μL总DNA时能扩增出SVBV特异谱带，相当于能够从不足1μg的草莓新鲜叶片中检测出SVBV。
4.对从爱美、芳玉、明磊、布兰登堡、高斯克、威斯塔尔、春香、全明星、宝交早生、甜心等10个草莓品种及东北草莓、绿色草莓2个野生草莓资源上扩增出的SVBV特异产物进行了回收、克隆和测序，所有的扩增片段大小均为预期的574bp，BLAST分析表明SVBV中国分离物外壳蛋白基因与GenBank中SVBV分离物(NC-01725)外壳蛋白基因的序列同源性为89％～93％，各个SVBV中国分离物在外壳蛋白基因序列上也存在着一定的差异。
5.基于对SVBV中国分离物外壳蛋白基因的序列分析比较，设计并筛选出了检测SVBV的理想引物I2/SM2。
6.以带有SVBV、SMYEV、SMoV的草莓品种宝交早生和仅带有SVBV的草莓品种全明星的匍匐茎为试材进行茎尖培养脱毒的研究。
7.以带有SVBV、SMYEV、SMoV的草莓品种宝交早生和仅带有SVBV的草莓品种全明星的试管苗为试材进行热处理脱毒的研究，结果表明：恒温和变温两种处理方式对草莓试管苗的存活率影响不大，能够脱除SMoV，但是恒温处理的脱毒率明显高于变温处理，分别为62.5％和12.5％。
8.茎尖培养的脱毒效果最好，热处理次之，在培养基附加三氮唑核苷未能脱除草莓病毒。