第一部分:RLIM参与p53功能调控及其分子机制研究　　 P53通过转录调控靶基因表达，参与细胞周期阻滞、凋亡、衰老、DNA损伤修复、细胞代谢及自噬等重要过程。P53处于细胞对应激信号反应的调控网络核心位置，其蛋白水平及功能受到严密的调控。众多的P53调控子中，HDM2处于核心地位。HDM2可促进P53泛素化及蛋白酶体降解，还可直接抑制P53转录活性。调控HDM2稳定性及功能，对于细胞启动适合的p53反应极为重要。RLIM/RNF12为含有LIM结构域的转录辅因子，具有E3泛素化连接酶活性。RLIM参与转录因子及胞内蛋白稳定性和功能调控。　　 本研究旨在探讨RLIM参与P53通路的调控及其分子机制。通过免疫共沉淀实验，发现RLIM在生理水平能够同P53及HDM2蛋白结合。体外转染、免疫印迹及定量PCR等实验发现过表达RLIM能够稳定p53蛋白，增强p53转录活性；而消减RLIM表达，p53蛋白水平减少，转录活性降低。RLIM能够特异性阻断HDM2对p53功能的抑制。RLIM能够阻断HDM2对p53的体内泛素化及降解。此外，RLIM也能促进HDM2体内泛素化及蛋白酶体降解，表明RLIM为新的HDM2的E3泛素化连接酶。环脂突变的RLIM可以激活p53通路及下游靶基因转录，表明RLIM对于p53功能的激活作用不依赖于其泛素化功能。采用PI标记及流式细胞仪检测发现，在肿瘤细胞诱导RLIM蛋白的微量过表达可以早期诱导G1期阻滞，后期出现凋亡反应。RLIM促进肿瘤细胞的凋亡依赖于细胞内功能性p53及HDM2蛋白表达。采用定量PCR法评估了RLIM在肝癌组织中表达情况，发现RLIM在肝癌组织中显著下调表达，与肝癌肿块大小相关。鉴定了RLIM为HDM2的E3泛素化连接酶，参与p53通路调控。初步阐释了RLIM参与p53通路调控的分子机制。加深了对p53调控机制的理解，为寻找针对p53通路的肿瘤治疗靶点提供了线索。