【摘 要】
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目的:探讨锌alpha2糖蛋白(Zinc-α2-glycoprotein,ZAG)是否通过法尼酯X受体(Farnesoid X receptor,FXR)改善肝脏脂肪沉积。方法:用胶原酶灌注法分离8周龄C57BL/6野生型(WT)和
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目的:探讨锌alpha2糖蛋白(Zinc-α2-glycoprotein,ZAG)是否通过法尼酯X受体(Farnesoid X receptor,FXR)改善肝脏脂肪沉积。方法:用胶原酶灌注法分离8周龄C57BL/6野生型(WT)和同窝出生FXR敲除杂合子(WT/KO)雄性小鼠原代肝细胞,原代肝细胞均用棕榈酸处理造成肝细胞脂质沉积,棕榈酸干预24小时后用Ad-ZAG转染细胞,并分为4组,即:(1)野生型组(WT);(2)野生型加过表达ZAG组(WT+Ad-ZAG);(3)FXR敲除杂合子组(WT/KO);(4)FXR敲除杂合子加过表达ZAG组(WT/KO+Ad-ZAG),其中WT+Ad-ZAG及WT/KO+ZAG两组行Ad-ZAG转染。细胞转染48小时后用油红O染色观察原代肝细胞内脂滴,酶法检测细胞内甘油三酯的水平,通过Western blot检测ZAG、代谢性核受体固醇调节元件结合蛋白(Sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)及脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FAS)蛋白表达水平。结果:1.在棕榈酸干预下,油红O染色显示与WT组比较,WT+Ad-ZAG组的原代肝细胞内橘红色脂滴明显减少;与WT/KO组相比,WT/KO+Ad-ZAG组原代肝细胞内橘红色脂滴无明显改变。细胞内甘油三酯测定显示,与WT组比较,WT+Ad-ZAG组的原代肝细胞内甘油三酯含量减少(P<0.01);与WT/KO组相比,WT/KO+Ad-ZAG组原代肝细胞内甘油三酯无明显改变(P>0.05)。2.与WT组相比,WT+Ad-ZAG组ZAG蛋白表达增加(P<0.01),SREBP-1c、FAS蛋白表达降低(P<0.05);与WT/KO组相比,WT/KO+Ad-ZAG组ZAG蛋白表达增加(P<0.01),而SREBP-1c、FAS蛋白表达无明显改变(P>0.05)。结论:ZAG可能通过FXR改善肝脏脂肪沉积。
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