斑茅割手密复合体(GXAS07-6-1)及其与甘蔗杂交后代的分子细胞遗传学研究

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甘蔗远缘杂交是解决现代甘蔗栽培品种遗传基础狭窄的重要途径。甘蔗属的野生种割手密和近缘属的斑茅是国内外多年来研究、利用的重点和热点。斑茅割手密复合体GXAS07-6-1聚集双亲的优点,在生势、综合农艺性状和抗性上具有超亲优势。本研究通过对GXAS07-6-1花粉母细胞减数分裂过程进行观察,了解其分裂过程的细胞学特征,同时利用基因组原位杂交技术(GISH)分析了GXAS07-6-1及其与甘蔗桂糖01-53杂交后代GXASF108-2-17、 GXASF108-2-22、GXASF108-2-32的染色体组成和遗传方式,获得的主要结果如下:1.GXAS07-6-1花粉母细胞减数分裂在终变期观察到单价体、二价体及三价体,以二价体为主;两次减数分裂的中、后、末期都观察到落后染色体;中期Ⅱ发现多种异常行为,如子细胞形状异常,子细胞染色体不规则排列及两个子细胞染色体不同步分裂;二分体时期出现微核;四分体时期观察到三分体、不均等四分体以及微核等异常现象,三分体占的比例较低,但微核发生的频率较高,达到70%。GXAS07-6-1的分裂指数为30%,具有较高的遗传不稳定性,而花粉育性为72.79%,花粉育性的降低可能与减数分裂异常行为有关。2.对染色体制片前根尖培养和预处理方法进行了优化:对于斑割复合体GXAS07-6-1,利用茎段28℃恒温保湿沙培,发根难,从桶栽植株取根的方法比较适宜;对于GXASF1材料GXASF108-2-17、 GXASF108-2-22、GXAS F108-2-32两种方法都能得到数量多、健壮的根,桶栽获得的根尖比较粗,酶解较快,而28℃恒温取材比较快速和方便。本实验养根主要采用茎段28℃恒温保湿沙培方法。根尖预处理方法选用对二氯苯饱和水溶液处理3h的效果最好,中期分裂相多,染色体形态好、较分散,便于观察计数。3. GISH研究结果表明,GXAS07-6-1的染色体为62条,其中27~30条来自母本斑茅GXA83-36,30-34条来自父本割手密GXS79-9,染色体按“n+n”方式传递;核型分析结果表明,GXAS07-6-1的核型比较对称,为原始的1B型。4. GXASF108-2-17、GXASF108-2-22、GXASF,08-2-32的染色体数目在75~84之间,其中69~73条染色体来自甘蔗GT01-53和割手密GXS79-9,7-11条来自斑茅GXA87-36,亲子间染色体的遗传方式为“n+n”,同时存在染色体丢失现象,丢失的染色体大多数为斑茅染色体。(GXASF108-2-17核型为2B,GXASF108-2-22和GXASF108-2-32核型为1B,都属于中部着丝点类型,核型模式图中可以看出3个F1的斑茅染色体长度都比较靠前。
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