CTGF对犬眼小梁切除术后滤过泡瘢痕形成的影响及MMC在术中有效量的初探

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目的:(1)检测犬眼小梁切除术后滤过泡瘢痕形成过程中滤过泡区域组织CTGF的表达量并结合外源性注入CTGF,探索CTGF对犬眼小梁切除术后滤过泡瘢痕形成的作用(2)通过研究不同年龄段犬小梁切除术中丝裂霉素的有效用量,为临床犬眼小梁切除术中丝裂霉素的合理使用提供参考依据。方法:(1)选取体质大致相同的本地杂交犬12只。左眼行小梁切除术为试验组,右眼不施手术作为对照组。分别于术后第3、5、7、14、21、28d各取两只眼球,试验组剪取滤过泡区域组织,对照组剪取相同区域组织,制成病理切片,进行免疫组织化学染色,电镜下观察并行图像定量分析。(2)选取体质大致相同的本地杂交犬12只左眼行小梁切除术,术后随机分为试验组和对照组,各6只。术眼结膜瓣下分别注射等量的CTGF和生理盐水(0.2m L/只),术后每天观察滤过泡生存情况,记录滤过泡失败时间。术前以及术后第1、3、5、7、14、21天测量并记录术眼眼压。(3)将24只试验犬按照年龄段分为青幼年犬组、老年犬组,每组各12只,组内再随机分为A、B、C、D四小组,每小组各3只,各组犬的双眼均行小梁切除术,术中A、B、C、D四组使用的丝裂霉素溶液的浓度分别是0.67mg/m L、0.50mg/m L、0.40mg/m L、0.00 mg/m L,观察术后30天的滤过泡形态并测量眼压。(4)最后通过Spass分析软件进行数据分析。试验结果:(1)试验组中CTGF蛋白阳性颗粒面的阳性面积率随手术后时间变化呈先升高后下降的变化,在术后第3天开始显著增高,术后第7天达到峰值,之后开始下降。术后第7天与术后第3、5、7、14、21、28天CTGF蛋白阳性面积率差异性极显著(P<0.01)。空白对照组中CTGF蛋白阳性颗粒面积率很小,各时间点CTGF阳性面积率差异性不显著(P>0.05)。术后各时间点试验组与对照组CTGF蛋白阳性面积率差异性极显著(P<0.01)。试验组中CTGF蛋白OD值随手术后时间变化呈先升高后下降的变化,在术后第三天开始急剧上升,术后七天达到峰值,之后呈持续下降趋势。术后第7天与术后第3、5、7、14、21、28天CTGF蛋白OD值差异性极显著(P<0.01)。对照组中CTGF蛋白OD值很低,术后各时间点差异性不显著(P>0.05)。试验组与对照组术后各时间点CTGF蛋白OD值差异性极显著(P<0.01)。(2)术眼结膜瓣下注射CTGF的试验组平均滤过泡失败时间为(13.16±0.98)d,对照组平均滤过泡失败时间为(20.05±1.05)d。试验组和对照组平均滤过泡失败时间差异性极显著(P<0.01)。试验组和对照组小梁切除术后眼压明显下降,之后各组眼压呈现回升趋势。对照组眼压回升较为缓慢,术后前5天眼压变化很小,在术后第二周眼压开始回升明显,术后21天眼压几乎回升至术前值。与此相比,试验组眼压回升迅速,第一周眼压回升最为明显,术后14天眼压回到术前值。试验组与对照组术后各时间点眼压值差异性极显著(P<0.01)。(3)各组术后30天眼压与术前眼压差值的差异性为:青幼年犬组A组眼压差值显著高于B组、C组、D组(P<0.01),老年犬组A组、B组眼压差值显著高于C组、D组(P<0.01)。术后30天青幼年犬组的A组均形成功能型滤过泡,B、C、D组形成的多为非功能型滤过泡。老年犬组的A、B组形成功能型滤过泡,C、D组中形成的多为非功能型滤过泡。结论:(1)在犬眼上施行小梁切除术可以达到降低眼压的效果,但术后瘢痕的形成率高,使得手术的长期效果不理想。CTGF表达水平在术后滤过泡瘢痕形成中呈先升高后下降的变化,7天达峰值。当外源性注入CTGF,加速了滤过泡瘢痕形成并导致手术失败。因此CTGF与小梁切除术滤过泡瘢痕形成密切相关,通过抑制CTGF的基因活性或阻断其表达,可能为提高青光眼滤过手术的成功率提供一个新的治疗途径。(2)丝裂霉素是小梁切除术中常用来抑制滤过泡瘢痕形成的药物,青幼年犬小梁切除术中的丝裂霉素溶液有效使用浓度为0.67mg/m L,老年犬小梁切除术中的丝裂霉素溶液有效使用浓度为0.50mg/m L。
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