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【目的】
1.构建淋病奈瑟菌OD450值（x）-活菌数（y）回归方程，利用分光光度计快速定量菌液浓度。
2.探讨淋病奈瑟菌感染小鼠脾脏单个核细胞对IL-1β、NLRP3表达的影响，为体外淋病奈瑟菌感染实验提供细菌浓度和感染时间的参考。
【方法】
测定不同稀释度的淋病奈瑟菌悬液OD450值，结合平板菌落计数法，建立淋病奈瑟菌OD450值（x）-活菌数（y）回归方程，利用分光光度计快速定量菌液浓度。提取C57BL/6J小鼠脾脏单个核细胞，以不同浓度的淋病奈瑟菌悬液感染小鼠脾脏单个核细胞1h、2h、6h、12h，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测各组IL-1β、NLRP3mRNA表达，筛选感染单个核细胞的最佳淋病奈瑟菌活菌浓度。选取上调IL-1β、NLRP3基因表达最高的OD450值的淋病奈瑟菌悬液与单个核细胞进行连续时间共培养，用RT-qPCR和蛋白免疫印迹法（WesternBlot）检测连续不同时间点IL-1β、NLRP3表达，并设立脂多糖（LPS）单阳性对照组，确立最佳感染时间。
【结果】
1.建立了淋病奈瑟菌OD450值（x）-活菌数（y）回归方程：y=287.65x-30.583（r2=0.9699）。
2.RT-qPCR检测：通过与OD450值=0的淋病奈瑟菌悬液比较，以OD450值=0.2、即活菌浓度为2.69×107CFU/mL的淋病奈瑟菌悬液感染小鼠脾脏单个核细胞，IL-1β、NLRP3的mRNA表达最高（P<0.05）；与感染时间为0h组相比较，淋病奈瑟菌（OD450值=0.2）感染单个核细胞1h后IL-1β、NLRP3的mRNA表达最高（P<0.05）；LPS可以上调IL-1β、NLRP3的mRNA表达，且高于同时间段淋病奈瑟菌组（P<0.05）。
3.WesternBlot检测：与感染时间为0h组相比较，淋病奈瑟菌（OD450值=0.2）感染单个核细胞1h后IL-1β、NLRP3表达最高（P<0.05）；LPS可以上调IL-1β、NLRP3表达，且高于同时间段淋病奈瑟菌组（P<0.05）。
【结论】
1.利用OD值计数淋病奈瑟菌悬液浓度简便、快捷。
2.淋病奈瑟菌感染小鼠脾脏单个核细胞可上调IL-1β、NLRP3表达；用以感染小鼠脾脏单个核细胞最佳淋病奈瑟菌活菌浓度为2.69×107CFU/mL（OD450值=0.2），最佳感染时间为1h。
1.构建淋病奈瑟菌OD450值（x）-活菌数（y）回归方程，利用分光光度计快速定量菌液浓度。
2.探讨淋病奈瑟菌感染小鼠脾脏单个核细胞对IL-1β、NLRP3表达的影响，为体外淋病奈瑟菌感染实验提供细菌浓度和感染时间的参考。
【方法】
测定不同稀释度的淋病奈瑟菌悬液OD450值，结合平板菌落计数法，建立淋病奈瑟菌OD450值（x）-活菌数（y）回归方程，利用分光光度计快速定量菌液浓度。提取C57BL/6J小鼠脾脏单个核细胞，以不同浓度的淋病奈瑟菌悬液感染小鼠脾脏单个核细胞1h、2h、6h、12h，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测各组IL-1β、NLRP3mRNA表达，筛选感染单个核细胞的最佳淋病奈瑟菌活菌浓度。选取上调IL-1β、NLRP3基因表达最高的OD450值的淋病奈瑟菌悬液与单个核细胞进行连续时间共培养，用RT-qPCR和蛋白免疫印迹法（WesternBlot）检测连续不同时间点IL-1β、NLRP3表达，并设立脂多糖（LPS）单阳性对照组，确立最佳感染时间。
【结果】
1.建立了淋病奈瑟菌OD450值（x）-活菌数（y）回归方程：y=287.65x-30.583（r2=0.9699）。
2.RT-qPCR检测：通过与OD450值=0的淋病奈瑟菌悬液比较，以OD450值=0.2、即活菌浓度为2.69×107CFU/mL的淋病奈瑟菌悬液感染小鼠脾脏单个核细胞，IL-1β、NLRP3的mRNA表达最高（P<0.05）；与感染时间为0h组相比较，淋病奈瑟菌（OD450值=0.2）感染单个核细胞1h后IL-1β、NLRP3的mRNA表达最高（P<0.05）；LPS可以上调IL-1β、NLRP3的mRNA表达，且高于同时间段淋病奈瑟菌组（P<0.05）。
3.WesternBlot检测：与感染时间为0h组相比较，淋病奈瑟菌（OD450值=0.2）感染单个核细胞1h后IL-1β、NLRP3表达最高（P<0.05）；LPS可以上调IL-1β、NLRP3表达，且高于同时间段淋病奈瑟菌组（P<0.05）。
【结论】
1.利用OD值计数淋病奈瑟菌悬液浓度简便、快捷。
2.淋病奈瑟菌感染小鼠脾脏单个核细胞可上调IL-1β、NLRP3表达；用以感染小鼠脾脏单个核细胞最佳淋病奈瑟菌活菌浓度为2.69×107CFU/mL（OD450值=0.2），最佳感染时间为1h。