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目的:肾间质纤维化(Renal interstitial fibrosis,RIF)是终末期肾脏疾病的常见病理表现,最终患者需要肾脏替代治疗,给社会家庭带来沉重负担。环状RNAs(circular RNA,circRNA)是一种新型的非编码RNA,参与各种疾病的发病机制。文献报道,circRNA＿15698作为miR-185的海绵,抑制其活性,进而上调转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1),加剧了系膜细胞胞外基质的积聚,加重了纤维化。但是,circRNA＿15698在叶酸诱导的肾间质纤维化中的作用尚未见报道。我们旨在探究circRNA＿15698是否促进叶酸诱导的肾间质纤维化及circRNA＿15698/miR-185/TGF-β1通路是否为肾间质纤维化的发生可能机制。研究方法:选取野生型CD1雄性小鼠,一次性腹腔注射剂量250 mg/kg的叶酸溶液,48小时后收取鼠尾血,分离血清,用于检测血清肌酐和尿素氮作为肾功能损伤的指标。叶酸注射30天后,肾脏PBS灌流至白色除去肾组织内残留的血细胞的影响后收取肾脏组织。1/2肾组织制成石蜡包埋组织块。石蜡块用于糖原染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)以确认肾间质纤维化肾组织形态学损伤,Masson染色分析肾脏间质纤维化程度,免疫荧光染色(Immunoflurorescent staining,IF)分析巨噬细胞浸润标志物CD68、促纤维化蛋白包括纤连蛋白(Fibronectin,Fn)和胶原蛋白1(Collagen 1,Col1)及TGF-β1的定位。其余肾组织-80°C深冻保存,用于提取RNA和蛋白质进行分子生物学检测,免疫印迹检测巨噬细胞浸润标志物F4/80、Fn、Col1、TGF-β1蛋白水平的变化并进行半定量。qRT-PCR检测RNA水平的表达变化,包括circRNA＿15698、miR-185、Tgfβ1、促炎性细胞因子白介素6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,Tnfα)、Fn、Col1。然后我们应用生物信息学技术CircInteractome和miRbase预测circRNA＿15698和mi R-185及miR-185和TGF-β1之间是否存在结合位点。结果:注射叶酸48小时小鼠血肌酐[(87.130±8.373)μmol/L v.s.(30.280±3.760)μmol/L,P<0.0001]和尿素氮[(12.970±2.068)mmol/L v.s.(6.438±0.902)mmol/L,P<0.0001]水平明显升高。叶酸注射30天时小鼠肾脏的PAS染色有肾小管刷状缘脱落,肾小管上皮细胞脱落坏死、空泡样变性、炎性细胞浸润、甚至肾小管形状消失等,半定量分析肾小管损伤评分升高(1.817±0.649 v.s.0.217±0.075,P=0.0001)。Masson染色可见肾小管损伤和肾间质纤维化,半定量分析肾间质纤维化程度升高(0.163±0.096 v.s.0.034±0.006,P=0.009)。qRTPCR结果显示在mRNA水平上促炎性细胞因子Il6(6.140±3.454 v.s.1.000±0.461,P=0.005)和Tnfα(4.847±2.662 v.s.1.000±0.653,P=0.006)表达升高。免疫印迹结果示巨噬细胞标志物F4/80蛋白水平升高(4.785±3.251 v.s.1.000±0.511,P=0.018),免疫荧光染色显示CD68阳性细胞增加。qRT-PCR结果显示,促纤维化基因Fn(3.244±2.251 v.s.1.000±0.336,P=0.036)和Col1(12.830±11.720 v.s.1.000±0.193,P=0.033)的mRNA水平升高。免疫印迹结果显示,促纤维化蛋白FN(3.906±2.759 v.s.1.000±0.293,P=0.028)、COL1(1.828±0.556 v.s.1.000±0.369,P=0.013)蛋白呈现高表达。qRT-PCR结果显示肾circRNA＿15698表达上调(5.357±4.150 v.s.1.000±0.521,P=0.029),miR-185表达下调(0.710±0.181 v.s.1.000±0.213,P=0.029),TGF-β1表达上调(4.919±2.447 v.s.1.000±0.227,P=0.003)。此外,CircInteractome和miRbase预测了circRNA＿15698和miR-185以及miR-185和TGF-β1之间具有结合位点。结论:1)在叶酸诱导的肾间质纤维化小鼠中,circRNA＿15698表达上调,miR-185表达下调,TGF-β1产生增多。2)本研究结果提示circRNA＿15698/miR-185/TGF-β1可能参与了肾间质纤维化的发生机制并发挥了重要作用,靶向作用于circRNA＿15698/miR-185/TGF-β1可能为肾间质纤维化治疗开辟新途径。