太白地区根肿病特性及生物防治研究

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根肿病是鞭毛菌亚门芸薹根肿菌侵染引起的十字花科植物土传病害,严重危害其根部导致根部肿大,影响养分吸收和水分运输,致使作物出现营养不良和萎蔫,甚至引起植株死亡。太白县以其优越地气候条件成为陕西省―高山蔬菜‖的主要种植区,蔬菜种植也成为当地主导产业,但随着十字花科蔬菜面积的扩大及种植年限延长,根肿病日趋严重,制约了蔬菜产业的发展。本文以太白县蔬菜种植区根肿病为研究对象,鉴定根肿病的生理小种分型;探究不同浓度根肿病病原菌在生长的不同时期接种对根肿病发病的影响,以及不同病级根际微生物群落组成结构的变化;通过盆栽和小区试验,研究生防菌菌株及微生物菌肥对根肿病菌的防治效果。主要结果如下:(1)太白地区根肿病病原菌生理小种分型为7号生理小种,盆栽试验表明:(1)根肿病在白菜长出第一片真叶后的10 d最易受根肿病菌感染,发病率最高;在相同的接种时期下,108 cfu·ml-1浓度接种发病率与发病程度最高;(2)根肿病发病程度与呼吸速率、气孔导度呈正相关,根肿病侵染后植株光合作用降低,呼吸作用增强,植物生长受到抑制;(3)白菜植株防御酶POD、PAL、PPO与发病率呈负相关,丙二醛含量与发病率呈正相关,对植物病害的抵抗能力降低。(2)微生物种群结构多样性分析表明:(1)发病甘蓝根际细菌OTU数目较未发病甘蓝显著降低,随着发病程度增加细菌种群多样性降低,而真菌种群多样性升高;(2)未发病(A0)与发病较重植株细菌及真菌群落结构具有明显差异,在细菌群落中,放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度度随发病程度降低,A2、A3和A4分别下降40.28%、43.12%和46.05%,而在真菌群落中,A2、A3和A4的子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度上升106.12%、92.92%和83.50%;(3)对所得根际真菌种群按功能类型进行分类,其中甘蓝根际病原菌的OTU相对丰度随病级不断升高。(3)从健株根系分离到1株对根肿病具有良好防效的菌株SP12,经初步鉴定结果为黄白链霉菌;结合实验室已有的生防菌株进行了抑病促生研究,结果表明:(1)SP12与D74接种可显著降低根肿病的发病率与病情指数,发病率分别降低50.0%和41.7%,病情指数分别降低20.3%和19.4%;(2)提高白菜地下鲜重36.6%和8.6%,地上部分分别提高25.4%和4.9%;(3)SP12与D74使根系活力分别显著增加46.2%和34.4%,PPO活力分别显著增加49.0%和66.5%,脯氨酸含量分别显著增加11.2%和35.1%,丙二醛含量分别显著降低5.2%和7.4%;SP12处理可提高POD活性,其增幅为26.4%。(4)SP12和D74可改变白菜根际土壤微生物群落结构组成,提高放线菌的数量63.7%和15.4%。综上结果表明,SP12与D74可通过提高植物抗性及改善根际微生物群落结构来防治白菜根肿病。(4)田间试验表明:(1)施用微生物菌肥可显著促进甘蓝的生长,其中根施+叶面喷施增幅最大,植株总重、球茎直径、球茎质量和水分含量提高18.3%、9.4%、22.8%和8.0%;同时甘蓝中Vc、纤维素及淀粉含量均有不同程度增加。(2)通过对不同施肥处理甘蓝植株基因表达量进行测定,根肿病抗性基因(BoCR9.1)、植物抗性基因(pdf1.2)、病程蛋白(PR5)、细胞色素C氧化酶(COX11)在叶面喷施处理植株叶片中表达量显著高于未进行叶面喷施处理植株。表明通过叶面喷施能够促进根肿病抗性基因表达,提高植株对根肿病的抵抗能力。综上所述,本文鉴定了太白地区根肿病病原菌为7号生理小种,根肿病的发生会导致植株根际微生态发生改变,使细菌种群数量减少,尤其放线菌门等有益微生物种群的减少,而真菌中有害病原菌种群数量增大,导致微生态平衡受到破坏。通过盆栽试验确定了根肿菌对白菜侵染的最佳时期为出现真叶后10 d,最适侵染浓度为108 cfu·ml-1,并且得到D74和SP12对根肿病的防治具有良好的效果,能够显著降低根肿病的发病率和病情指数。在太白地区通过施用微生物菌肥及叶面喷施微生物菌肥,两种处理方式均对甘蓝生长、营养积累和抗性酶活有促进作用,且叶面喷施微生物菌肥能显著提高BoCR9.1、pdf1.2和COX11等根肿病抗性基因的表达,以增强甘蓝植株对根肿病侵染的抵抗能力。
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