两种几丁质合成抑制剂对赤拟谷盗(Tribolium castaneum)发育的影响

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赤拟谷盗Tribolium castaneum是一种分布范围十分广泛的仓储类害虫。它为害面包、面粉、谷类和干果,但不侵蚀完全干燥的谷粒。赤拟谷盗的臭腺会持续地分泌石炭酸,污染谷物和面粉,造成严重的经济损失。与其它仓储害虫相比,赤拟谷盗具有更高的抗药性。但同时,由于它繁殖周期短、对生存环境要求低、体积小方便群体饲养等优点,使之成为实验室研究杀虫剂效果常见的一类模式昆虫。将化学杀虫剂与谷物混合是目前防治赤拟谷盗的主要方法之一。但这种防治方法严重危害人类健康和生态安全,虽然有很高的杀虫效果和广泛的使用范围,仍需要去寻找对非目标生物和环境友好、符合害虫综合治理原则的杀虫剂。昆虫生长调节剂(IGRs)可满足这一需求。这类化合物对仓储害虫,甚至对有机杀虫剂有抗药性的品系,都有很强的杀灭效果。同时,对哺乳动物和其他非目标生物的毒性非常低,而且通常能在环境中迅速降解。这一特点使其成为常规化学农药的替代品种。几丁质是一种广泛分布在昆虫表皮、气管壁、中肠围食膜的天然多糖,仅存在于真菌、线虫和昆虫中,但不存在于植物和高等脊椎动物体内。几丁质合成抑制剂的作用靶标为几丁质,其作用特点是抑制几丁质在生物体内的合成,从而影响害虫正常生理生化活动,使其死亡。这一特点决定了几丁质合成抑制剂具有高度选择性。苯甲酰基脲类杀虫剂是一类高效的几丁质合成抑制剂。氟苯脲和双苯氟脲都是对鞘翅目抑制作用较显著的苯甲醜基脲类杀虫剂,本文主要从以下方面测定氟苯脲和双苯氟脲对赤拟谷盗生长发育的影响:酰1.氟苯脲摄入对赤拟谷盗发育的影响用氟苯脲处理赤拟谷盗五龄幼虫,当氟苯脲处理浓度在10mg/L及以上时,幼虫死亡率高达98%以上,且幼虫几乎无法化蛹。而氟苯脲处理浓度为1mg/L及以下时,幼虫死亡率低于35%,化蛹率在55%以上。1mg/L氟苯脲显著影响赤拟谷盗幼虫化蛹和羽化活动。化蛹开始时间比对照组延迟1-2天。未能化蛹的幼虫在氟苯脲处理后6天内形成僵虫。进入化蛹阶段的幼虫,有的蛹体被旧表皮包裹、翅膀发育畸形、保持蛹的形态而死亡,有的可以进入羽化阶段,头部和胸部发育正常,但翅膀发育异常,未能鞣化,不能翻折到中胸背板上,同时尾部保持蛹期形态,有的旧表皮无法褪下,最终导致死亡。2.氟苯脲摄入对几丁质合成相关酶基因表达量的影响1mg/L氟苯脲处理后第二天,赤拟谷盗幼虫体内大部分与几丁质合成有关的酶表达量都下降,其中TcChS1b和TcChS2基因表达量下降的幅度最大,几乎达到检测下限。处理后第四天,TcTre1-3、TcTre1-4、TcTPS基因表达量明显上调。可见,氟苯脲的毒理机制是抑制几丁质合成酶。当几丁质合成被抑制后,活跃的海藻糖酶代谢为赤拟谷盗幼虫解毒和生命活动提供能量。3.双苯氟脲摄入对赤拟谷盗发育的影响当双苯氟脲处理浓度在10mg/L及以上时,幼虫无法化蛹,死亡率接近100%。当双苯氟脲处理浓度为1mg/L及以下时,幼虫死亡率低于45%,化蛹率在50%以上。与氟苯脲处理的结果类似,赤拟谷盗幼虫的生长发育受到抑制,化蛹时间推迟。双苯氟脲对赤拟谷盗化蛹和羽化的影响与氟苯脲类似,抑制其翅膀的正常发育,旧表皮难以褪下,化蛹和羽化过程紊乱。4.双苯氟脲摄入对几丁质合成相关酶基因表达量的影响双苯氟脲处理后,大部分参与几丁质合成的酶基因表达量都下调,且在第四天也依然表达量低于对照组。TcTre1-2下调非常显著,我们推测海藻糖酶是双苯氟脲的作用位点。由于海藻糖酶是几丁质合成通路上的第一个酶,当其转录水平受到抑制,下游的酶表达量都会有相应的下调。
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