黄药子化学成分及体外抗肺癌细胞A549、PC-9的活性研究

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目的:黄药子(Dioscorea Bulbifera L.)具有化痰散结消瘿,清热解毒的功效,其主要成分为二萜内酯类、黄酮类等。具有抗肿瘤、抗甲状腺疾病、抗氧化等药理作用。本论文利用多种色谱方法进行黄药子中化学成分的分离、纯化和鉴定,并探究得到的化合物在体外对人肺癌细胞影响,从中筛选出具有抗肺癌的活性成分;以黄独素B、儿茶素、薯蓣皂苷元的成分含量为评价指标,优选黄药子的最佳提取工艺。方法:1.采用80%乙醇回流提取得到黄药子浸膏,通过液-液萃取、硅胶柱色谱、快速纯化制备液相色谱仪、半制备型高效液相色谱仪和Sephadex LH-20凝胶柱等方法分离化合物,并通过MS、13C-NMR和1H-NMR鉴定化合物结构。2.CCK-8法检测单体化合物对肺癌细胞A549、PC-9的抑制作用。3.采用G1-熵权法的主客观赋权法结合响应面优化设计,比较料液比、提取时间、乙醇体积分数对黄药子中薯蓣皂苷元、儿茶素、黄独素B提取率的影响,优选黄药子的最佳提取工艺。结果:1.从黄药子中分离得到了 7个化合物,鉴定了其中5个化合物的结构,化合物1为薯蓣皂苷元、化合物2为黄独素B、化合物3为3.5-dimethoxyphenol、化合物 4 为 3α-羟基-13β-呋喃-11-酮-阿派-8-烯-(20,6)-内酯、化合物5为儿茶素,其中化合物3首次从黄药子中分离得到。2.CCK-8检测发现,与其他化合物相比,儿茶素、黄独素B、薯蓣皂苷元表现出对肺癌细胞A549、PC-9较强的抑制作用,其IC50值分别为 111.3μmol/L、60.54 μmol/L、176.7 μmol/L、142.1 μmol/L 和89.24 μmol/L、170.4 μmol/L。3.响应面法结合G1熵权法优化黄药子的最佳提取条件为:提取时间1.87 h,乙醇体积分数47.48%,料液比1:29.95。结论:通过各种色谱手段从黄药子中分离得到7个化合物,鉴定其中5个化合物结构,其中3,5-dimethoxyphenol首次从黄药子中分离得到。对肺癌细胞A549、PC-9的增殖抑制实验中,黄独素B、儿茶素和薯蓣皂苷元对肺癌细胞A549、PC-9表现出较强的增殖抑制作用。优化工艺方法便捷,结果可靠,可为今后黄药子的研究提供参考。
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