中性粒细胞的清除在小鼠腹膜炎肺损伤中作用

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目的:1、研究正常小鼠建立急性细菌性腹膜炎模型后肺损伤的情况;2、研究正常小鼠去除中性粒细胞后腹膜炎并发肺损伤的情况;3、通过观察并比较小鼠经过不同的处理后肺损伤的情况,来研究小鼠中性粒细胞的清除在小鼠继发性细菌性腹膜炎并发急性肺损伤的作用及影响。方法:1、将80只体重在20-23g的健康清洁小鼠分为两组,每组40只,分为去除中性粒细胞组(N)、未去除中性粒细胞组(T):2、将N组小鼠于尾静脉注射单克隆抗体Ly6G-lA8试剂,通过小鼠眼角内眦静脉毛玻璃管采血,检测尾静脉注射前及注射24小时(h)后的血常规,记录抗体注射前后小鼠外周血中性粒细胞计数.T组小鼠尾静脉注射生理盐水对照,并同上操作检测小鼠注射前后中性粒细胞计数;3、将N组及T组小鼠分别再分为腹膜炎组及伪腹膜炎组,共四组,每组小鼠各20只,标记为去除中性粒细胞腹膜炎组(NP),去除中性粒细胞伪腹膜炎组(NS),未去除中性粒细胞腹膜炎组(TP),未去除中性粒细胞伪腹膜炎组(TS):4、四组小鼠尾静脉注射药物12h后开始禁食,自由饮水,禁食12h,注射抗体24小时(即禁食12h后)后予腹腔注射大肠杆菌液及生理盐水,NP、TP两组小鼠腹腔注射用Mc Farland标准管比浊计数制成3x108CFU/ml浓度的大肠杆菌液,NS及TS组腹腔注射等量生理盐水作对照组;5、通过观察四组小鼠的死亡情况、肺病理切片、肺湿/干比值、氧合指数,评价肺损伤程度;6、取肝、脾组织作病理,观察腹膜炎情况;6、无菌环境下取四组小鼠的腹腔积液、肝、脾脏组织匀浆做细菌培养及鉴定。结果:1、建立腹膜炎以及伪腹膜炎模型至24h时四组小鼠死亡率分别为:NP:60%,NS:0%,TP:75%, TS:0%;NP, TP组均有小鼠死亡,NS及对照组(TS)无小鼠死亡:以大肠杆菌建立腹膜炎模型组的小鼠比较,NP组小鼠死亡率比TP组低,两组比较具有显著差异性(p<0.01)。2、腹膜炎组小鼠(NP,TP)开胸后胸腔积液明显,肺、肝、脾脏组织病理切片显示中性粒细胞浸润,有急性肺损伤:NP与TP组小鼠比较,NP组小鼠的肺组织湿/干比值较TP组低(2.74±0.43vs3.92±0.88)(p<0.01),NP组小鼠氧合指数高于TP组(443.22±28.20 vs 250.58±23.01)p<0.01),NP组小鼠肺组织损伤评分低于TP组(5.4±0.8 vs7.8±1.3)(p<0.01);3、伪腹膜炎组(NS及TS)组小鼠开胸后无明显胸腔积液,肺组织湿/干比值低,氧和指数正常,肺、肝、脾脏病理切片均无明显异常,两组小鼠无明显差异性(p>0.05);4、四组小鼠无菌环境下取腹腔积液及肝脾组织匀浆培养后,腹膜炎组(NP及TP)小鼠可见细菌生长,经鉴定为G-杆菌,镜下显示为大肠杆菌,伪腹膜炎组(NP及TP)未见明显细菌生长。结论:1、尾静脉注射单细胞克隆抗体Ly6G-lA8可将小鼠外周血中的中性粒细胞清除;2、尾静脉注射单细胞克隆抗体Ly6G-lA8清除小鼠外周血中性粒细胞,可影响腹膜炎小鼠的死亡,其机制可能与降低小鼠腹膜炎所致的急性肺损伤有关。
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