论文部分内容阅读
目的:光镜及电镜观察大鼠角膜酸烧伤后形态学的变化及碱性成纤维细胞生长因子2(Fibroblast Growth Factor2，FGF2)、基质金属蛋白酶9(MatrixMetalloproteinase-9，MMP-9)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor alpha，TNF-α)的表达，探讨大鼠角膜酸烧伤后损伤修复机制。 方法:3～4月龄健康成年SD大鼠50只，无眼病，体重200±15g，随机分为5组，分别是正常对照组、酸烧伤后1d组、7d组、14d组、28d组，每组10只。实验组建立酸烧伤模型，用1mol/L硫酸溶液烧灼大鼠角膜建立酸烧伤模型，酸烧伤后1d、7d、14d、28d。4个时相点处死大鼠取角膜组织，利用透射电镜观察酸损伤后角膜超微结构变化，常规石蜡切片HE染色，并行FGF2、MMP-9、TNF-α免疫组织化学染色，观察各时相点大鼠角膜各层组织病理学变化及FGF2、MMP-9、TNF-α的表达情况，并用图像分析软件进行细胞形态学计数及测量各阳性反应产物的平均光密度。 结果:与正常对照组比较，主要变化有:(1)酸烧伤后的大鼠角膜上皮层在烧伤后1d可见角膜上皮层细胞高度水肿、胞内的内质网、线粒体、角膜蛋白丝等细胞器不清、细胞核结构消失，细胞间隙增宽，酸烧伤后7d可见有血管生成，14d～28d进入修复期，可见角膜上皮层细胞间隙变窄，线粒体、内质网等细胞器可见，可见新生的上皮表面的绒毛、微绒毛结构。(2)烧伤后的大鼠角膜组织上皮层及基质层在不同时相点病理切片观察与正常角膜对照组相比，可见角膜组织有不同程度的多型核白细胞(polymorpho-nuclear leucoyte，PMN)浸润导致急性炎症反应，烧伤后7d可见有新生血管的生成腔内有红细胞，烧伤后14d～28d血管腔退化。(3)FGF2免疫组化染色与正常对照组相比，烧伤后1d表达开始增强(P＜0.01)，7d表达最强(P＜0.01)。(4)MMP-9免疫组化染色与正常对照组相比，烧伤后1d表达最强(P＜0.01)，7d表达减弱(P＜0.01)。(5)TNF-α免疫组化染色与正常对照组相比，烧伤后1，7d，14d表达增强，有统计学意义。 结论:(1)透射电镜下观察表明，酸烧伤后的大鼠角膜组织上皮层在不同时相点超微结构发生了损伤性改变。(2)病理切片观察与正常角膜对照组相比可见角膜组织有不同程度多型核白细胞浸润导致的急性炎症反应，并伴有新生血管的生成。(3)FGF2免疫组化染色与正常对照组相比，烧伤后1d表达开始增强，7d表达最强，以后表达逐渐减弱，这与新生血管的变化趋势一致。证实FGF2的表达可能与角膜新生血管有相关性。(4)MMP-9免疫组化染色与正常对照组相比，烧伤早期1d就达到最强，并且表达主要位于上皮层内，证实MMP-9的表达主要参与上皮层基底膜及细胞外基质的溶解破坏，为角膜上皮层新生血管的长入提供了很好的条件。(5)TNF-α免疫组化染色与正常对照组相比，烧伤早期上皮层与基质层TNF-α的表达开始增强，7d达最强。说明TNF-α的早期表达参与了角膜基质层急性炎性反应的始动作用溶解基质，中期的强表达可能也促进角膜新生血管的生成，需进一步去证实。