吉祥草为百合科植物吉祥草Reineckia carnea(Andr．)kunth［Sanseviera An-dr］的全草，又名观音草、玉带草、小叶万年青等，具有凉血止血、清肺止咳、解毒利咽等功效，常用于治疗肺热咳嗽、咳血、慢性支气管炎、哮喘、风湿性关节炎及跌打损伤等。研究表明，吉祥草全草主要含有甾体皂苷类、黄酮类、萜类、木脂素、有机酸等多种化学成分，其中甾体皂苷类化合物是其药理作用的主要物质基础。甾体皂苷是一类由螺甾烷类化合物与糖结合的寡糖苷，现代研究表明，甾体皂苷类化合物有多种药理作用，特别在抑制肿瘤、降血糖血脂、防治心血管疾病和免疫调节等方面。　　本课题组前期从吉祥草根茎乙酸乙酯部位分离得到了一个甾体皂苷RCE-4，研究表明RCE-4具有良好的诱导肿瘤细胞凋亡的作用，尤其对人宫颈癌细胞（Caski）、人肝癌细胞（HepG2）、人神经母细胞瘤细胞（SHSY-5Y）有明显的增殖抑制作用，IC50值分别为3.71、14.54、19.04μM，而对正常细胞基本无毒。因此我们将RCE-4作为一个非常有潜力的抗肿瘤药物，进一步对其药效、毒理及代谢过程进行研究。本实验室前期对RCE-4诱导Caski细胞凋亡的作用机制进行的大量研究表明，RCE-4可通过PI3K/Akt/NF-κB/炎症因子途径、抑制Survivin（生存素，一种凋亡抑制蛋白）、线粒体凋亡通路和激活细胞自噬来发挥其抗Caski作用，这些途径可能是其发挥抗肿瘤作用机制之一(如图1)。然而，RCE-4在生物体内的吸收、分布、代谢和排泄特点仍然未知。因此，本课题拟对吉祥草中以RCE-4为主的主要甾体皂苷成分展开体内外药物代谢研究，为药物的早期阶段研究提供一定的理论依据。　　1.吉祥草抗肿瘤活性成分的富集。以RCE-4为目标物，采用正反相硅胶柱色谱、重结晶、高效液相色谱从吉祥草根茎乙酸乙酯部位分离得到吉祥草主要抗肿瘤活性成分甾体皂苷，利用气相色谱、红外、质谱、核磁共振（氢谱、碳谱、HSQC、HMBC和TOCSY等）等波谱技术和化学方法鉴定了其中2个化合物为甾体皂苷，结构分别为25(S)-5β-spirostan-1β,3β-diol1-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranoside(ZJY-E-1)、25(S)-5β-spirostan-1β,3β-diol1-O-α-D-arabinopyranosid-(1→2)-β-L-Rhamnopyranosyle(ZJY-E-2)。　　2.吉祥草甾体皂苷的抗肿瘤活性研究。MTT法检测吉祥草中两种不同成分的甾体皂苷混合物和其中的两个甾体皂苷单体ZJY-E-1和ZJY-E-2对Caski细胞的细胞毒活性，结果显示混合物I、混合物II、ZJY-E-1和ZJY-E-2对Caski细胞的IC50分别为7.53、8.07、15.14、18.36μM/L。ZJY-E-1、ZJY-E-2均为螺甾烷醇型甾体皂苷，仅存在糖链的差别，由此可见糖链的不同对于甾体皂苷的抗肿瘤活性具有很大影响。　　3.吉祥草甾体皂苷在Caski细胞的代谢研究。建立了以RCE-4为主的吉祥草甾体皂苷测定的LC-MS/MS方法，此方法专属性强，在规定条件下不受其他内源性物质干扰，灵敏性较高。观察给药后Caski细胞状态，发现2h时细胞形态开始从梭形趋向圆形，慢慢死亡；利用LC-MS/MS技术分析吉祥草甾体皂苷在Caski细胞的代谢产物，发现了4种可能的代谢方式和8个可能的代谢产物。　　4.吉祥草甾体皂苷灌胃给药SD大鼠后的入血成分研究。首先验证供试品溶液的短期、长期及冻融稳定性，均符合实验要求；采用蛋白沉淀法对血浆样品进行预处理，采用ESI离子源LC-MS/MS正离子模式检测样品，结果在给药1h的血浆样品中检测到RCE-4的分子离子峰733m/z，以及代谢产物的分子离子峰579、571、546、437m/z。