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目的:通过戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)诱导大鼠点燃模型,观察激光氧液(laser oxygenate fluid,LOF)对大鼠学习记忆、海马内神经细胞凋亡及海马内Glu和GABA含量动态变化的影响,来探讨激光氧液治疗癫痫的机制,并为癫痫的临床治疗开辟新的思路。 方法:选21 d日龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠300只随机分为模型糖水组(PTz+GS组)、模型激光氧液组(PTZ+LOF组)、盐水糖水组(NS+GS组)、盐水激光氧液组(NS+LOF组)和空白组(Sham组)五个组,每组60只。模型两组采用戊四氮腹腔注射制作慢性癫痫模型,盐水两组给予等体积生理盐水,模型制作成功后分别给予激光氧液(LOF)及糖水(GS)尾静脉注射,空白对照组不予任何处理;选择处理后当天(0天)、3天、7天、10天和14天时间点进行观察,确保每个时间点6只大鼠,以Y-型电迷宫评价大鼠的认知功能,视频监测点燃及治疗过程中各组不同时间点大鼠的发作情况,应用免疫组织化学方法评价海马神经细胞凋亡的表达及采用高效液相方法检测海马组织G1u和GABA含量。 结果:1、行为学变化:PTZ+GS组、PTZ+LOF组慢性点燃后大鼠学会达标次数明显增多(P<0.05),LOF治疗后,PTZ+LOF组7 d~14 d各时间点较相对应的PTZ+GS组大鼠学会达标次数明显减少(P<0.05),尤以14 d明显。PTZ+LOF组大鼠在治疗后7 d~14 d惊厥发生率显著下降,在第14 d时比治疗前下降到50%,同PTZ+GS组比较在治疗7 d~14 d时两者差异均有统计学意义(P<0.05)。 2、2.1 Bax(CA1区)阳性细胞数结果:PTZ+GS组、PTZ+LOF组点燃后大鼠海马内Bax阳性细胞数明显高于NS+GS组、NS+LOF组、Sham组(P<0.05),LOF治疗后,PTZ+LOF组阳性细胞数较PTZ+GS组明显减少(P<0.05),减少趋势尤以10d明显。2.2 Bcl-2(CA1区)阳性细胞数结果:PTZ+GS组、PTZ+LOF组点燃后大鼠海马Bcl-2阳性细胞数明显高于NS+GS组、NS+LOF组、Sham组(P<0.05),LOF治疗后,PTZ+LOF组阳性细胞数较PTZ+GS组差异有显著性(P<0.05),以10d较著。 3、PTZ+GS组和PTZ+LOF组点燃后海马组织Glu的含量较NS+GS组、NS+LOF组和Sham组有显著增高(P<0.05),PTZ+LOF组各时间点Glu含量较PTZ+GS组下降(P<0.05),以3 d下降趋势明显,从132.88下降到122.52μmol/g。GABA含量在PTZ+GS组和PTZ+LOF组各时间点浓度也大于NS+GS组、NS+LOF组和Sham组(P<0.05),点燃大鼠经LOF治疗后海马中GABA含量较PTZ+GS组明显升高,其中在7 d、10 d、14 d三个时间点上较PTZ+GS组差异有显著性(P<0.05)。 结论:LOF可以改善发育期点燃癫痫大鼠的认知功能及惊厥发作频率,其机制可能是LOF降低癫痫大鼠海马内Glu含量,提高GABA浓度,并通过上调海马内Bcl-2、下调Bax的表达来降低点燃大鼠海马神经细胞的凋亡。