载阿霉素液—固相变原位凝胶联合HIFU消融治疗兔VX2肝癌的研究

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目的:自制载阿霉素液-固相变原位凝胶,研究凝胶相变情况,药物释放曲线,注射载阿霉素液-固相变凝胶治疗HIFU消融后兔VX2肝癌,观察肿瘤内凝胶分布情况,肿瘤体积变化情况,肿瘤细胞增殖情况,肿瘤相关蛋白表达情况。方法:以乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、阿霉素(DOX)为原料,自制载阿霉素液-固相变原位凝胶,高效液相色谱法(HPLC)研究药物释放曲线,超声动态监测凝胶体外相变情况;以24只兔建立VX2肝癌模型,对肿瘤行HIFU不全消融,随机分为HIFU消融与载药凝胶联合治疗组、HIFU消融与空白凝胶联合治疗组,每组12只,冰冻切片荧光显像观察凝胶在肿瘤内部分布情况,超声动态监测治疗前后肿瘤体积变化,免疫组化法检测PCNA表达情况,Westernblot分析Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:高效液相色谱法测得自制载阿霉素液-固相变原位凝胶10天阿霉素累积释放率为:(43.13±5.91)%,超声监测显示凝胶在接触液体介质一瞬间表面即发生相变,内部凝胶随时间进一步发生由液态逐渐变为固态的相变过程;超声监测显示HIFU消融与载药凝胶联合治疗组肿瘤生长明显减慢,生长率明显低于HIFU消融与空白凝胶联合治疗组(P<0.05),免疫组化法显示HIFU消融与载药凝胶联合治疗组肿瘤增殖指数明显低于HIFU消融与空白凝胶联合治疗组(P<0.05),冰冻切片荧光显像提示药物在从肿瘤中心向周围呈阶梯状分布,Westernblot分析显示HIFU消融与载药凝胶联合治疗组肿瘤Bcl-2蛋白表达明显低于对照组,而Bax表达高于对照组.结论:兔VX2肝癌模型是研究肝癌的良好模型。载阿霉素液-固相变原位凝胶联合HIFU消融治疗兔VX2肝癌能提高HIFU消融的疗效,为肿瘤的微创与联合治疗提供了新的研究方向。
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