论文部分内容阅读
目的:帕金森病(Parkinsons disease，PD)是一种常见的神经系统退行性疾病，往往还伴随一些非运动症状，其中抑郁是很常见的一种，严重影响了PD患者的生活质量。目前PD伴发抑郁的具体发病机制还不明确。本研究的主要目的是通过研究氟西汀和左旋多巴对PD伴发抑郁小鼠行为学和脑内5-HT2B受体表达的影响，以及对原代培养的星形胶质细胞中5-HT2B受体表达的影响，明确氟西汀和左旋多巴对PD小鼠伴发的抑郁症状是否有治疗作用，并进一步探讨其可能的治疗机制。 研究方法:1、C57BL/6小鼠双侧纹状体注射6-OHDA，对照组注射生理盐水。给药后稳定3周进行分组，分为Con组、6-OHDA组、L-dopa/benserazide组、Fluoxetine组、6-OHDA+ L-dopa/benserazide和6-OHDA+ Fluoxetine组。根据分组每天腹腔注射相应药物，每日一次，持续四周。然后，用RT-PCR和Western Blot检测小鼠大脑皮质中5-HT2B受体的表达变化。给药前后，对小鼠分别进行爬杆实验、转动杆实验、悬尾实验、游泳实验、旷场实验、糖水偏好实验等行为学实验，评估其抑郁行为和运动功能。2、C57BL/6小鼠腹腔注射MPTP，对照组注射生理盐水，1周后进行分组，分为Con组、MPTP组、L-dopa/benserazide、MPTP+ L-dopa/benserazide组。根据分组每天腹腔注射saline或L-dopa/benserazide，持续四周。然后，用RT-PCR和Western Blot检测大脑皮质中5-HT2B受体的表达变化。给药前后，对小鼠分别进行爬杆实验、转动杆实验、悬尾实验、游泳实验、旷场实验、糖水偏好实验等行为学实验，评估其抑郁行为和运动功能。3、原代培养星形胶质细胞，待细胞成熟后用6-OHDA处理细胞6h、12h、24 h、48 h。然后，用RT-PCR和Western Blot检测细胞中5-HT2B受体的表达变化。4、原代培养星形胶质细胞，待细胞成熟后用6-OHDA和MPTP处理24 h后换液，用L-dopa、Fluoxetine长期给药2周用RT-PCR和Western Blot检测细胞中5-HT2B受体的表达变化。 结果:1、运动功能行为学实验显示，MPTP及6-OHDA处理组小鼠在爬杆实验中，爬杆时间明显长于对照组;转动杆实验中MPTP及6-OHDA处理组小鼠在水平杆上停留时间明显少于对照组。抑郁行为学实验显示，MPTP及6-OHDA处理组小鼠蔗糖实验的蔗糖偏好值低于65％;悬尾、游泳实验中MPTP及6-OHDA处理组小鼠肢体不动时间明显多于对照组;旷场实验中MPTP及6-OHDA处理组小鼠直立次数少于对照组。以上行为学实验MPTP及6-OHDA处理组与对照组比较均具有统计学差异(P＜0.05)。2、PD伴发抑郁的小鼠在用L-dopa、Fluoxetine治疗后，以上指标均有所恢复。3、PD伴发抑郁的小鼠大脑皮质中5-HT2B受体的mRNA和蛋白表达下降，但用L-dopa、Fluoxetine作用后小鼠脑中5-HT2B受体表达上调。4、用MPTP、6-OHDA处理原代培养的星形胶质细胞24 h后，细胞中5-HT2B受体mRNA和蛋白表达下降，在用L-dopa、Fluoxetine作用两周后星形胶质细胞中5-HT2B受体表达发生上调。 结论:L-dopa、Fluoxetine慢性处理可改善PD伴发抑郁小鼠的抑郁行为。通过对两种动物模型的研究，发现PD伴发抑郁与小鼠脑内5-HT2B受体表达下调有关。而应用L-dopa、Fluoxetine可上调脑内星形胶质细胞中5-HT2B受体水平，进而起到治疗作用。