研究背景:不良妊娠结局包括各种先天性畸形，以及妊娠早期的自然流产与胚胎停育等，占全部妊娠的较高比例，给家庭和社会带来沉重的负担。有研究表明，妇女在围受孕期补充叶酸可以减少胎儿畸形的初发和再发，体内叶酸缺乏与叶酸代谢和转运相关的基因多态性则构成了不良妊娠结局的相关危险因素，与血清叶酸相比，红细胞叶酸更能反映体内叶酸的真实水平。目前对我国围受孕期妇女，缺乏评价体内叶酸水平的恰当指标，对于不良妊娠结局患者叶酸代谢相关基因多态性也缺乏统一的认识，在适合我国高危人群的叶酸增补方案上也存在争议。因此准确评价不良妊娠结局患者的红细胞叶酸水平和研究叶酸代谢相关基因多态性具有非常重要的意义。 研究目的: 1.检测不良妊娠结局患者叶酸代谢相关基因MTHFR677C＞T、1298A＞C、RFC-180A＞G的多态性，观察各基因型在病例组和对照组的分布，探讨不良妊娠结局的可能影响因素。 2.比较病例组和对照组的血清叶酸、红细胞叶酸水平和叶酸转运比(TROFA)，以及进行不同基因型病例的比较，了解叶酸在不良妊娠结局中的作用，为围受孕期妇女的叶酸增补方案提供理论依据。 材料和方法: 1.采用病例-对照研究模式，选取不良妊娠结局患者(63例)和正常对照组(48例)，均来自协和医院妇产科门诊或病房。 2.提取外周血基因组DNA，运用PCR-RFLP的方法检测病例组和对照组MTHFR677C＞T、1298A＞C、RFC-180A＞G基因的多态性，统计分析病例组和对照组基因型分布的差异。 3.检测血清叶酸、红细胞叶酸和维生素B12水平，计算叶酸转运比，比较病例-对照之间的差异。统计分析不同基因型下血清叶酸、红细胞叶酸和叶酸转运比水平。 结果: 1.MTHFR677CT与677CC相比，在对照组和病例组之间的分布具有显著性差异，染色体异常组677CT和677TT的比例尤其高。MTHFR1298A＞C的突变频率较低，病例组和对照组没有显著性差异。RFC-180GG与AA相比，在对照组和病例组之间的分布有显著性差异。各基因型在不同病例类型之间没有显著性差异。 2.MTHFR677C＞T和RFC-180A＞G基因的复合突变中，CT/AG和CT/GG两种基因型的组合与纯合子组和CC/AA相比有显著性差异，OR值分别为2.78和3.29。 3.病例组血清叶酸水平高于对照组，而红细胞叶酸、叶酸转运比均比对照组低，两组之间有显著性差异。血清叶酸、红细胞叶酸和叶酸转运比在MTHFR677C＞T的三种基因型之间没有显著性差异；而RFC-180GG基因型的叶酸转运比较AA和AG基因型明显下降，与80AA相比具有显著性差异。 结论: 1.MTHFR677C＞T和RFC-180A＞G突变是不良妊娠结局的危险因素。MTHFR1298A＞C突变频率较低，病例组和对照组相比没有显著性差异。MTHFR677C＞T和RFC-180A＞G的复合突变增加了不良妊娠发生的风险。 2.病例组的红细胞叶酸和叶酸转运比均低于对照组，叶酸转运比在个体中相对稳定，可能与RFC-180A＞G的多态性相关，在临床上可以作为提示叶酸转运和利用能力的指标。