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由Penicillium expansum引起苹果、梨等水果的青霉病，是水果采摘后的重要病害之一，严重影响了果实的食用价值和市场价值。生物拮抗菌能有效防治果实采摘后腐烂，降低化学杀菌剂的用量，从而增加食品的安全性，降低了潜在的环境危害，然而人们对酵母拮抗菌的作用机理还没有具体的相关报道，拮抗菌的抑菌机理的研究是增强拮抗菌的生防效果以及进行菌株筛选的重要前提。近年来，尽管不少研究者在生防模式方面做了不少工作，但由于目前研究方法和手段的有限性，拮抗酵母菌的生防模式目前还不是非常清楚。目前的研究结果表明拮抗酵母菌的主要抑菌模式包括营养竞争、空间位点竞争、寄生、分泌几丁质酶和葡聚糖酶。本文主要从异常毕赤酵母SRF对苹果采摘后青霉病的防治效果，单倍体的获得以及酵母拮抗菌P. anomala SRF外切葡聚糖酶基因的克隆与表达，外切葡聚糖酶基因敲除载体的构建等四个部分进行了研究，主要结果如下：1.异常毕赤酵母SRF能够有效地抑制苹果青霉病的发生，拮抗菌的抑菌效果与使用浓度呈正相关，酵母拮抗菌的使用浓度越高，苹果青霉病的发病率越低，病斑直径也就越小。2.根据已报道的P. anomala外切葡聚糖酶基因设计引物，克隆了SRF外切葡聚糖酶基因，命名为PaExg（GenBank: AJ222862.1）。基因和氨基酸序列分析表明，PaExg开放阅读框（ORF）长1284bp，编码427个氨基酸，分子量为49.469kD，等电点为4.72。序列比对和同源性分析表明，该序列与GenBank登录的P. anomala strain K的同源性高达100%，PaExg的保守结构域分析表明，PaExg属于GH15家族。构建了SRF外切葡聚糖酶基因原核表达载体，并在IPTG诱导下在大肠杆菌中获得了成功表达，表达的转化子表现出明显的葡聚糖酶活性，验证了该菌株葡聚糖酶基因的克隆。3.通过对预培养时间、温度、盐离子及其梯度浓度培养条件进行了研究。确定了异常毕赤酵母SRF野生型二倍体细胞的最佳产孢条件，在YPD培养基上预培养24h，连续传代2次后，于最佳诱导培养基上（葡萄糖1%，乙酸钠1.4%，氯化钾0.4%，琼脂2%），28℃诱导培养7d，其产孢率能达80%以上。K+和Ac-对异常毕赤酵母SRF孢子的产生起到关键作用。4.通过分析SRF外切葡聚糖酶基因序列和PUG6载体上的多克隆位点上的酶切位点关系，设计了三对引物进行PCR扩增，构建出带有SRF外切葡聚糖酶基因上下臂的敲除载体，通过单酶切切出一段长度为2500bp的葡聚糖酶基因敲除组件。