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目的:了解右美托咪定对脂多糖刺激的Raw264.7巨噬细胞内炎症相关指标及乳酸水平的影响,并探讨其中机制。方法:第一部分实验分为三组,分别为:Control组:不加入脂多糖(LPS)及右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX);LPS组:给予LPS,500ng/m L;LPS+DEX组:预先给予DEX 10μmmol/L,30min后加入相同浓度的LPS。观察时间终点设置为0.5h,1h,1.5h,2h,3h,6h,12h。相应时间点结束后,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western Blot)检测不同组间及不同观察时间点Nur77转录及翻译水平,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)联合酶标仪检测各组上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-10(IL-10)浓度的变化,另外使用乳酸测定试剂盒检测细胞内乳酸的变化水平。第二部分实验分为七组,分别为:Control组:同第一部分实验中Control组处理;LPS组:加入LPS,500ng/m L;LPS+si NC:细胞转染si NC培养72h后,加入LPS,500ng/m L;LPS+si Nur77:细胞转染si Nur77培养72h后,加入LPS,500ng/m L;LPS+DEX组:预先加入DEX 10μmmol/L,30min后加入LPS,500ng/m L;LPS+DEX+si NC组:细胞转染si NC培养72h后,预先加入DEX 10μmmol/L,30min后加入LPS;LPS+DEX+si Nur77组:细胞转染si Nur77培养72h后,预先加入DEX 10μmmol/L,30min后加入LPS。3h后检测上述各组巨噬细胞内Nur77蛋白表达水平,并测定细胞培养上清液中IL-1β,IL-10浓度。结果:第一部分实验:单独LPS刺激巨噬细胞后,Nur77m RNA及蛋白在0.5h开始表达升高,并在1h达到高峰,随后LPS作用时间延长,则呈现下降趋势;但在6h曾出现增长的第二次高峰,峰值较1h值明显低。DEX预处理后,随着观察时间延长,LPS诱导的巨噬细胞内Nur77转录和翻译水平上升,在观察时间为2h时,其相对表达水平较单独LPS诱导显著增高(P<0.05),并达到高峰;随后在观察时间为≥3h且≤12h时,LPS+DEX组中Nur77m RNA水平反而低于LPS组。但其蛋白水平在3h时,两组间无明显差异(P>0.05),从6h开始,LPS+DEX组中Nur77蛋白水平低于LPS组;至12h时,LPS+DEX组中蛋白相对表达再次明显高于LPS组(P<0.05)。此外,在观察时间≤3h时,DEX降低LPS诱导的IL-1β表达,但明显增高IL-10表达;而在作用时间为6h及12h时,DEX升高LPS诱导的上清液中IL-1β表达,伴随IL-10水平的下降。另外,在观察时间≤2h时,DEX预处理明显降低LPS诱导的细胞内乳酸浓度,而在观察时间3h及6h时,DEX显著增加激活巨噬细胞内乳酸水平(P<0.05);而在12h时,DEX再次明显增加LPS诱导的巨噬细胞内乳酸的生成(P<0.05)。第二部分实验:转染si Nur77m RNA后,相应组别的Nur77蛋白表达水平均较未转染前明显降低(P<0.05)。同时LPS+DEX+si Nur77组中IL-10浓度较LPS+DEX显著降低(347.91±5.46 vs.394.55±3.23 pg/m L,P<0.05),而上清液中IL-1β浓度显著高于LPS+DEX组(100.15±2.29 vs.81.04±1.22 pg/m L,P<0.05)。结论:在LPS诱导的炎症反应早期(≤3h),DEX可通过上调Nur77表达增加IL-10释放,抑制IL-1β表达。此外,DEX在观察时间早期(≤2h),降低LPS诱导的巨噬细胞内乳酸水平,而在作用较长时间时,则呈现相反的调节结果,此机制需进一步探讨。