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鸡马立克氏病(Marek′s disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek′sdisease virus,MDV)引起的一种淋巴肿瘤性疾病。致病型MDV在鸡体内的感染分为早期溶细胞期、潜伏期、第二次溶细胞期以及肿瘤转化期四个阶段,这几个阶段出现及维持的时间与病毒毒力、宿主的遗传抗性具有很大的关系。
本课题选用疫苗株CVI988/Rispens和广西分离的超强毒MDV(vvMDV)YL040920/C6,分别人工感染MD抗性品系霞烟鸡及普通品系霞烟鸡。通过SYBR GreenI双标准曲线实时定量PCR技术,动态检测了在2-50DPI(days post infection)内超强毒MDV(vvMDV)YL040920/C6及疫苗株CVI988/Rispens分别在抗性品系与普通品系鸡脾脏中的病毒载量变化。研究了不同致病型MDV在抗性不同的宿主脾脏中,其复制动力学的差异及病毒载量与肿瘤发生的关系。
研究结果表明:1、vvMDV毒株YL040920/C6在抗性品系和普通品系霞烟鸡脾脏中的溶细胞期分别结束于4DPI和5DPI,此时病毒载量达到峰值(分别为1 06.5335±0.324 copies/1 06cells和l06.8270±0.12825 copies/106cells);2、溶细胞期结束后MDV进入潜伏期感染,抗性品系的潜伏期结束于9DPI,而普通品系的潜伏期结束于10DPI,随后病毒载量显著上升;3、相对于YL040920/C6株的病毒载量而言,疫苗CVI98 8/Rispens没有出现似类于YL040920/C6株之明显的病毒载量变化,且其病毒载量始终维持在103.3582±0.4361copies/106cells之间,低于YL040920/C6株10-1000倍,这种低水平复制可能是宿主获得免疫保护而不发病的原因之一;4、脾脏发生肉眼可见肿瘤之后,其病毒载量并不一定高于未发生肿瘤转化的脾脏,而且在10DPI之后,无论是在抗性品系还是普通品系,发生肿瘤与没有发生肿瘤的脾脏的病毒载量之间均无显著差异(P>0.05)。说明病毒载量的高低并不能很好的反映肿瘤的发生情况,但可以作为判断鸡是否感染了MDV强毒的依据。
本课题对vvMDV毒株的复制动力学进行了研究,并首次在国内对比了疫苗CVI988/Rispens在不同抗性品系霞烟鸡脾脏的复制动力学,发现了不同致病型MDV在体内复制动力学的差异,为研究MDV的致病机制、宿主的遗传抗性机制及疫苗的保护机制提供了有用的实验数据。