唑来膦酸混合骨水泥的缓释效果及缓释液对肿瘤细胞的细胞毒性研究

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研究背景:骨肿瘤的发病率将近0.01%,外科手术治疗仍是骨肿瘤及各种原因导致的骨折的主要治疗手段。目前骨水泥混合抗生素的缓释研究在实验和临床应用中较为成熟,但对于骨水泥携带唑来膦酸治疗骨肿瘤的研究目前却未见报道。目的:观察骨水泥混合唑来膦酸后药物唑来膦酸的释放效果,以及缓释出的唑来膦酸对肿瘤细胞的抑制效果。证明骨水泥混合唑来膦酸的试件能够有效的释放唑来膦酸,证明唑来膦酸缓释液能够对所选的乳腺癌肿瘤细胞具有抑制作用。为使用骨水泥混合唑来膦酸治疗转移性骨肿瘤患者提供理论和实践基础。方法:制备六组不同唑来膦酸浓度的骨水泥试件。10g骨水泥试剂分于六组(0.5mg、1.25mg、2.5mg、3.75mg、5.0mg、和0mg)的唑来膦酸试剂均匀混合。混合均匀后制成标准规格的骨水泥模块。长度为(12±0.1)mm、直径为(6±0.1)mm的直圆柱体。在37℃下保存于完全相同的5mL无菌去离子水中,每连续24h取出蒸馏水,并换新的蒸馏水继续浸泡,取出蒸馏水作为样品用于高效液相色谱检测药物释放和细胞毒性试验(MTT)观察对乳腺癌细胞的抑制作用。细胞生长抑制率=B-A/B×100%(A表示实验孔的平均光密度,B为对照孔的平均密度.抑制率=1-存活率)。结果:各组唑来膦酸骨水泥均在24h内释放剂量最大,而48h时浓度迅速下降,4d后达到稳定水平。2周后释放处于极其微量状态。实验显示唑来膦酸释放浓度和速率与骨水泥中混合唑来膦酸比率大小有关,总体呈正性关系。MTT实验显示,唑来膦酸对乳腺癌细胞有明显细胞毒性,前4天抑制效果最明显(均P<0.05),其对乳腺癌细胞抑制效果可持续4周(均P<0.05)。缓释液的浓度和肿瘤细胞的抑制作用强弱均与唑来膦酸在骨水泥中的混合浓度呈现正相关。结论:唑来膦酸能够从骨水泥中释放出来,缓释液仍然具有生物活性。并且缓释液对体外培养的乳腺癌细胞具有明显的抑制作用。释放的唑来膦酸的浓度和其对乳腺癌细胞的抑制效果和时间有相关性。唑来膦酸混合骨水泥治疗骨肿瘤疾病具有可操作性,也为下一步的动物体内实验和临床实验提供了理论和实验基础。
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