CT灌注成像对大鼠急性脑缺血血管重建的研究

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第一部分CT灌注成像对大鼠急性脑缺血再灌注模型的评价目的:在活体状态下应用CT灌注成像( CT perfusion imaging ,CTPI)技术,研究其评价大鼠急性脑缺血再灌注模型的可靠性及准确性。方法:利用线栓法制作大鼠急性脑缺血再灌注模型,分别行CTPI检查、2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色及HE染色。结果: 1.每组CTPI各时间点脑血流量(CBF)图核心区及脑血容量(CBV)图低灌注区体积之间差异无显著性(p>0.05),二者所示体积与TTC染色梗死区体积之间差异无显著性(P>0.05),与平均通过时间(MTT)图缺血区体积之间差异有显著性(P<0.05)。MTT缺血区体积与TTC染色梗死区体积之间差异有显著性(p<0.05)。2. CTPI各参数图与TTC染色梗死体积间均呈相关关系,其中CBV相关性最好。3.取CBF、CBV匹配性降低区域脑组织做HE染色,图示以神经细胞死亡表现为主,取CBF降低、CBV正常区域脑组织做HE染色,图示以神经细胞变性损伤为主。结论: CTPI可在活体状态下实现快速、准确、无创的评价脑缺血再灌注动物模型的脑部血流动力学改变,显示脑梗死缺血的部位、大小、程度,对超急性期脑梗塞治疗及复查具有重要的临床应用价值。第二部分CT灌注成像在超急性脑梗死实验中的诊断价值目的:应用CT灌注成像(CT perfusion imaging ,CTPI)技术,观察大鼠超急性脑梗死不同时间点脑血流动力学变化及半暗带(Ischemic penumbra ,IP)的演变,为临床早期诊断治疗提供依据和指导。方法:雄性成年Wistar大鼠,随机分为缺血组(n=24)及假手术组(n=6)。各组术后1、2、3、4、5、6h分别连续行CT灌注扫描及HE染色检查。结果:⒈假手术组: CTPI及HE染色均表现阴性。⒉缺血组CTPI表现:①梗死中心区CBF、CBV较对侧明显减低,MTT明显延长,差异有显著性(p<0.05);IP区CBF较对侧减低明显,差异有显著性(p<0.05)。②梗死中心区缺血1h、2h与缺血3h、4h、5h、6h比较rCBF、rCBV及MTT变化明显,差异有显著性(p<0.05)。③梗死中心区与IP区、周围正常组织区比较,rCBF、rCBV及MTT差异有显著性(p<0.05);IP区较周围正常区rCBF差异有显著性(p<0.05)。④梗死中心区梗死面积随缺血时间延长扩大明显,1h、2h与3h、4h、5h、6h比较差异有显著性(p<0.05)。同一时间点不同样本之间,梗死面积的差别与CBF减低的程度密切相关。⒊缺血组HE染色表现:缺血1h、2h、3h血管间隙增宽,神经元数量减少,神经细胞轻度水肿;缺血4h、5h、6h血管间隙,神经元间隙显著增宽,神经核固缩,神经细胞和血管周围大量空泡状改变。结论: CTPI检查无创、简单快捷,可以在超急性脑梗死实验中及时、准确显示梗死及IP的部位范围,并定量分析其血流动力学变化情况,大大缩短了治疗时间窗,可为临床治疗提供有力依据。第三部分骨髓间质干细胞治疗缺血性脑卒中实验的影像学应用价值目的:探讨影像学检查在MSCs治疗缺血性脑卒中实验研究中的应用价值。方法:雄性成年wistar大鼠,随机分假手术组(Sham组),脑缺血组再灌注组(MCAO组),PBS治疗组和MSCs治疗组,每组分别于造模成功后1d,3d,7d, 14d, 28d行CT灌注成像(CT perfusion imaging,CTPI)、MRI检查、神经功能评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2-3-5triphenylterazolium ,TTC)染色、HE染色及微血管密度分析。结果:⒈Sham组每时间点血流动力学未见明显异常,脑组织未见明显梗死区域。2. MCAO组、PBS组、MSCs组:①CTPI参数图、T2WI图与TTC染色显示梗死体积差异无显著性;MSCs组与MCAO组、PBS组比较7 d、14 d、28 d梗死体积差异有显著性,p<0.05。②MSCs组与MCAO组、PBS组比较,rCBF在7 d、14 d、28 d升高,差异有显著性,p<0.05;神经功能评分减低明显,微血管密度明显增高,HE染色示缺血周边区细胞变性坏死程度减低。⒊MSCs移植治疗组3d及7d在梗死灶周围见点状长T1、短T2信号,14d及28d低信号向梗死病灶方向弥散,强度减低。结论: CTPI和MRI影像技术,可以从形态学及血流动力学方面观察MSCs治疗缺血性脑卒中的疗效,磁标记MSCs的MRI检查,实现了活体追踪标记细胞在脑内的存活、迁移及分化,为干细胞移植研究提供一个宽广的平台。
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