第一部分4NQO诱导舌鳞状细胞癌动物模型【目的】本研究利用4NQO饮水法诱导Wistar大鼠产生TSCC,对TSCC及其癌变过程的大体及病理形态进行动态观察。【方法】4NQO溶于1,2丙二醇以配置成2%母液。母液用高压灭菌纯净水配置成40μg/ml溶液后通过饮水法作用于Wistar大鼠。30只5周龄的Wistar大鼠随机分成实验组和对照组。实验组20只大鼠饮40μg/ml 4NQO溶液,对照组10只大鼠饮用高压灭菌纯净水。24周时,处死大鼠,取舌体组织和静脉血,通过组织病理学评价TPL及TSCC发生发展情况。【结果】通过4NQO饮水法,构建Wistar大鼠TSCC模型。在4NQO干预下,实验组大鼠的舌黏膜相继出现白色斑块,糜烂,溃疡,颗粒状增生及菜花状新生物改变。病理检查显示实验组大鼠舌黏膜上皮处出现经典的单纯性上皮增生、异常增生、原位癌到浸润癌逐渐过渡的病理性变化。对照组大鼠舌黏膜呈粉红色,舌乳头分布均匀,无白色斑块、溃疡和新生物形成,病理检查舌黏膜无明显异常。【结论】通过4NQO饮水法成功构建Wistar大鼠TPL和TSCC模型。第二部分血浆来源细胞外囊泡的提取、鉴定和蛋白质组学研究【目的】为探究潜在的TPL和TSCC标志物,通过蛋白组学分析大鼠舌鳞癌发生过程中（TPL和TSCC）血浆来源EVs的差异表达蛋白及其作用。【方法】应用exo Easy试剂法提取血浆EVs,通过纳米颗粒跟踪分析、透射电镜和蛋白质免疫印迹鉴定血浆EVs。通过胰蛋白酶酶解EVs,TMT标记蛋白,联用高效液相色谱与质谱进行分析,分析舌黏膜癌变过程中大鼠血浆来源的细胞外囊泡差异性表达蛋白。通过基因本体（Gene Ontology,GO）数据库和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）数据库分析差异表达蛋白富集的通路,通过STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用网络（protein–protein interaction,PPI）分析差异表达蛋白的相互作用。【结果】在分离和鉴定大鼠舌黏膜癌变过程中血浆来源EVs的基础上,通过蛋白质组学,确定了血浆EVs内的1660个可信蛋白,并通过主成分分析,样品相关性分析,样品层次聚类分析确定组间差异较大,组内生物学重复性较好。相较于健康对照组,749种和593种蛋白分别在TPL和TSCC中差异表达;相较于TPL组,94种蛋白在TSCC中差异表达。差异表达蛋白的生物信息学分析显示,这些差异表达蛋白富集于细胞增殖、翻译、上皮结构、伪足和黏着斑等通路。蛋白质-蛋白质相互作用网络显示,核糖体蛋白、真核翻译因子3、翻译延伸因子和含伴侣素的T复合蛋白位于蛋白互作网络的核心区域,提示翻译和RNA转运等通路在TPL和TSCC中均被激活。【结论】大鼠舌黏膜癌变过程中部分血浆来源的EVs蛋白在TSCC发生发展过程中差异表达。这些差异表蛋白反映了TSCC发生发展过程中的细胞增殖、代谢、氧化还原和细胞侵袭能力的变化,血浆来源的EVs蛋白质组学研究有望为口腔黏膜癌变的标志物筛选和癌变机制研究的提供实验依据。