静磁场促进骨形成的强度和时间效应研究

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骨质疏松症(osteoporosis,OS)是一种因骨量减少、骨组织细微结构破坏、骨的脆性增加而导致骨折危险性增加的全身性骨骼疾病。随着人口老年化的进程,骨质疏松发生率呈逐年上升趋势,成为中老年骨痛、骨折及骨折致残的主要原因之一。许多究结果表明:低频电磁场可缓解骨质疏松患者疼痛并提高骨密度,因此具有良好开发应用前景。但不同研究机构、不同作者所采用磁场参数差别很大,出现不同的实验结果。本论文系统研究了不同强度和不同处理时间静磁场对体外培养大鼠成骨细胞分化成熟的影响,以及最佳磁场强度和处理时间下静磁场对大鼠股骨组织的影响,以期为应用静磁场防治骨质疏松和阐明电磁场促进骨形成的机制奠定基础。本论文实验共分为四部分,在第一部分建立了酶消化法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞的方法,并诱导其分化成熟形成钙化结节;第二部分采用1.5~4.5mT(间隔0.6mT)的静磁场每天处理成骨细胞30min,采用MTT法检测细胞增殖情况,并通过分析碱性磷酸酶(ALP)活性、钙化结节形成情况、以及成骨相关基因表达水平评估静磁场对细胞增殖和分化成熟的影响;第三部分采用筛选获得的最佳强度静磁场每天分别处理成骨细胞0.5~4.0h(间隔0.5h),采用同样方法分析该静磁场对细胞增殖和矿化成熟的影响;第四部分采用最佳强度和时间的静磁场处理体外培养股骨组织,以期从组织水平进一步评价所筛选静磁场的促进骨形成效应。实验结果表明,3.9mT静磁场具有促进成骨细胞分化和矿化成熟的最佳活性,每天处理2.5h是静磁场的最佳处理时间,以3.9mT每天处理体外培养股骨组织2.5h可获得显著高于对照组的ALP活性、钙盐含量和成骨相关转录因子和生长因子的基因表达水平。本实验为下一步开展动物实验,并最终以最佳参数开展低频电磁场防治骨质疏松的研究奠定了扎实基础。
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