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实验目的:探讨Ang-(1-7)与A779通过G蛋白偶联受体Mas对体外培养的人肝癌细胞株Huh-7增殖凋亡及细胞周期的影响。检测Ang(1-7)和A779分别作用于体外培养的人肝癌Huh-7细胞后,人肝癌细胞株Huh-7中Mas的表达情况。探讨Ang-(1-7)和A779通过G蛋白偶联受体Mas对体外培养的人肝癌细胞株Huh-7迁移能力的影响。探讨Ang-(1-7)和A779通过G蛋白偶联受体Mas可能在人肝癌细胞Huh-7中所发挥的作用。实验方法:(1)运用实时定量RT-PCR法,检测药物作用于体外培养的人肝癌Huh-7细胞后,细胞中Mas表达情况。(2)运用流式细胞仪,检测药物作用于体外培养的人肝癌Huh-7后,细胞的增殖凋亡和细胞周期变化情况。(3)运用划痕愈合法和Transwell法,检测药物作用于体外培养的人肝癌Huh-7后,细胞的迁移能力变化情况。实验结果:(1) Ang-(1-7)和A779分别作用于体外培养的人肝癌Huh-7细胞后,未引起细胞结构、细胞形态以及细胞排列方式发生明显变化。(2)Ang(1-7)和A779分别作用于体外培养的人肝癌Huh-7细胞后,Ang(1-7)组与对照组相比细胞凋亡增多,A779组与对照组相比细胞凋亡减少。Ang(1-7)组、A779组和对照组的凋亡率分别为95.2%、30. 2%和42. 7%。Ang(1-7)组明显高于对照组(P<0.05), A779组低于对照组(P<0.05)。(3)RT-PCR:Ang(1-7)组、A779组和对照组中Mas相对表达量依次为2. 735、0.498和1,Ang(1-7)组高于对照组,A779组低于对照组,差别均具有统计学意义(P<0.05)。(4)在本研究中,药物Ang-(1-7)和药物A779对体外培养的人肝癌Huh-7细胞周期的影响不明显。(5)划痕愈合实验测得Ang(1-7)组、A779组和对照组的划痕愈合率分别是9. 70%、22. 27%和20. 74%。Ang(1-7)组与对照组相比明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0. 05)。(6)Transwell法测得Ang-(1-7)组、A779组和对照组的细胞计数分别是247、370和385。Ang(1-7)组与对照组相比明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验结论:(1)Ang-(1-7)通过G蛋白偶联受体Mas能促进体外培养的人肝癌Huh-7细胞的凋亡,抑制体外培养的人肝癌Huh-7细胞的增殖。A779通过G蛋白偶联受体Mas能抑制体外培养的人肝癌Huh-7细胞的凋亡,有促进体外培养的人肝癌Huh-7细胞的增殖的作用。(2) Ang(1-7)通过G蛋白偶联受体Mas可抑制体外培养的人肝癌huh-7细胞的迁移能力,A779对体外培养的人肝癌huh-7细胞的迁移影响不明显。