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目的:
(1)用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测自身抗体，探讨自身抗体检测对系统性红斑狼疮(SLE)病人的诊断价值。
(2)采用Real-Time PCR检测SLE病人外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cell,PBMC)中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达，分析miRNA与SLE的关系。
(3)比较治疗前、治疗后SLE病人PBMC中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达变化，分析miRNA与SLE病情发展的相关性及miRNA在SLE诊断中的临床意义。
方法:
采集17例健康对照者和22例治疗前、治疗后SLE病人外周血，分别采用:
(1)间接免疫荧光法检测抗核抗体(antinuclear antigen，ANA):加入25μL已稀释血清于抗原膜片上，孵育30min后，取出抗原片，用PBS浸洗，自然干燥，再滴加FITC-抗人IgG抗体孵育30min，继续用PBS浸洗，自然干燥，最后用甘油封片，在荧光显微镜下观察结果。
(2)免疫印迹法检测可提取性核抗原(extractable nuclear antigen，ENA)抗体:取商品化的ANA谱印迹膜条，加入待检血清，37℃温育，待抗原抗体结合后加入酶标记抗人IgG，再加入显色剂显色，显色后的膜条用EUROLineScan软件判断结果。
(3) Real-Time PCR检测 miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达:先分离PBMC，提取总RNA，再进行逆转录反应，用实时定量PCR检测miRNA的表达。
结果:
(1) SLE患者ANA检测的阳性率为86.4％，与健康对照者比较，差异具有统计学意义(P＜0.05)，其中核颗粒型、核均质型、胞浆颗粒型、核仁型分别为45.4％、31.8％、4.5％、4.5％。
(2) SLE患者ENA抗体总阳性率为86.4％，其中抗尿嘧啶-1低分子量核蛋白抗体（抗U1-nRNP）、抗Smith抗体（抗Sm）、抗双链DNA抗体（抗dsDNA）、抗核小体抗体(AnuA)、抗组蛋白抗体(Histones)、抗核糖体P蛋白抗体(ARPA)、抗干燥综合征A抗体（抗SSA）、抗干燥综合征B抗体（抗SSB）、抗Ro-52抗体阳性率分别为54.5％、36.4％、40.9％、59.1％、50％、36.4％、59.1％、27.3％、59.1％，与健康对照者比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
(3)SLE患者PBMC中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达均低于健康对照者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
(4)治疗前SLE患者组miRNA-155、miRNA-181a的表达低于治疗后SLE患者组，差异具有统计学意义（P＜0.05），治疗前SLE患者组miRNA-146a、miRNA-31的表达与治疗后SLE组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。
结论:
1.ANA、ENA抗体检测在SLE患者中的阳性率均为86.4％，部分患者ANA、ENA抗体为阴性。
2.miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a在SLE病人PBMC中的表达下调，治疗后患者PBMC中miRNA-155、miRNA-181a的表达明显高于治疗前。
3.部分患者ANA、ENA抗体为阴性，而4种miRNA在SLE患者PBMC中表达普遍降低，提示上述miRNA有望成为SLE患者的辅助诊断及病情监测指标。