草地早熟禾组织培养体系构建及转化探究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:regicide09
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草地早熟禾(Poa pratensis L.)是一种复杂的多倍体植物,利用传统的育种技术改造目的性状难度较大,而基因工程技术可以快速地达到预期目标,其中建立高效率的组织培养体系是基因工程技术体系中的重要环节。本研究以生产中常见的12个草地早熟禾成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导、愈伤组织增殖及分化体系进行了研究,并用农杆菌介导法进行基因转化研究。在愈伤组织诱导研究中发现,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织诱导率在60%到93%之间,2,4-D浓度3mg/L时12个早熟禾品种的愈伤组织诱导率均值最高,达到86%;在2,4-D基础上添加少量6-BA(0.1-0.2mg/L)后,不同品种愈伤组织诱导率在30%到92%之间,12个品种的愈伤组织诱导率均值有所降低(3.1%-25.4%)。在愈伤组织增殖研究中发现,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织增殖率在38%到164%之间,12个早熟禾品种的愈伤组织增殖率均值在3mg/L 2,4-D时最高,达到81%;在3mg/L 2,4-D基础上施加少量的6-BA(0.05-0.2mg/L)后,愈伤组织增殖率均值有所降低,但存在品种的差异性。在愈伤组织分化的研究中发现,2mg/L 6-BA对愈伤组织的分化效率最高,在2mg/L 6-BA基础上施加少量的2,4-D能提高部分品种的愈伤组织分化率。研究结果还显示,热激处理对部分草地早熟禾愈伤组织诱导及增殖有一定的促进作用。
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