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鞘翅目是昆虫纲中最大的一个目，鞘翅目害虫能对农林生产产生极大的危害，因此对于鞘翅目害虫的防控具有重要的意义。目前，对鞘翅目害虫有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌(Bt)菌种不多，相应制剂的种类也较少，且国内还没有杀鞘翅目害虫的Bt制剂的生产和应用。本实验室分离的Bt菌株YM-03对鞘翅目害虫（如猿叶虫、马铃薯甲虫、柳蓝叶甲等）具有毒杀活性，其杀虫蛋白基因为cry3Aa8(accession number: AY572010)。由于YM-03发酵不整齐、杀虫晶体蛋白产量少，因此不适于用作工业生产使用菌株。本研究采用经改造的苏云金芽孢杆菌解离系统将cry3Aa8克隆到Bt无晶体突变株BMB171中，得到无外源抗生素抗性基因的环境安全的工程菌BMB3Aa8nr-h38，此工程菌能高效表达Cry3Aa8杀虫晶体蛋白，其含量约为0.2mg/ml(NB培养基)，与野生菌株YM-03相比提高3倍多。生测结果表明，BMB3Aa8nr-h38和YM-03的孢晶混合物对柳蓝叶甲的LC50分别为3.09(1.37，6.66)μl/ml与10.79(4.98，25.61)μl/ml。遗传稳定性试验表明，工程菌BMB3Aa8nr-h38经8次转接（8h/次）后阳性克隆子所占比率仍高达99％。采用正交设计对此工程菌的发酵培养基进行优化，得到最佳培养基配方为成分A3.00g/100ml，成分B2.25g/100ml，成分C0.75g/100ml，成分D1.50ml/100ml，成分E0.20g/100ml，成分F0.50g/100ml，成分G0.15g/100ml，成分H0.04g/100ml。利用此发酵培养基培养工程菌BMB3Aa8nr-h38得到Cry3Aa8含量约为2.1 mg/ml。生测结果表明利用此发酵培养基培养工程菌BMB3Aa8nr-h38的发酵液对柳蓝叶甲具有较高的杀虫活性，LC50为1.13(0.98,1.29)μl/ml。