BMP4和FGF5两基因对鹅毛囊及羽毛发育作用的研究

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本试验以胚胎期和生后期吉林白鹅为研究对象,采集10-130日龄鹅背部羽毛,观察羽毛生长发育和羽毛形态变化。同时采集胚胎期20-30胚龄和生后期10-130日龄鹅背部皮肽,采用免疫组织化学法和荧光定量PCR技术研究BMP4和FGF5两个基因在鹅皮肤组织不同发育时期的表达部位以及表达规律,探讨其对羽毛发育的作用及影响。鹅羽毛生长发育规律结果:鹅羽毛发育经历胎毛,雏羽,成羽(片羽和绒羽)三个阶段。出生时全身呈现黄色的胎毛,15日龄时幼鹅背部开始出现白色雏羽,35日龄时胎毛完全退掉,白色片羽和绒羽长出体表,80日龄左右片羽和绒羽又将雏羽换掉且生长迅速,120日龄左右羽毛发育成熟;片羽在38日龄出现羽小钩,70日龄左右羽枝基本融合;片羽和绒羽的长度、直径以及羽小枝长度和直径均随日龄的增加而增大,40-90日龄羽毛的长度、直径和羽小枝长度及直径增长速度较快,90日龄后增长速度减慢,110日龄后呈平稳生长状态。120日龄左右发育成熟。本试验期间记录的每天光照时间、温度、湿度等数据,并与羽毛发育进行相关分析,结果证明日龄和基因对鹅羽毛生长发育的影响显著大于环境因素。BMP4和FGF5的定位表达及其对鹅羽毛发育的作用结果:BMP4和FGF5两基因在羽毛和毛囊发育的整个过程中均有表达。BMP4在胚胎期27天左右主要在初级毛囊毛乳头和基底部的髓质部位表达,生后10天在初级毛囊的阳性表达减少,而在次级毛囊毛囊乳头部位以及整个髓质部位呈较强的阳性表达。随着日龄的增加,BMP4的表达开始由基底部逐渐向上延伸,胚胎期21天到生后40天表达量均处于较低水平;40-70日龄BMP4在初级毛囊的羽枝嵴和羽轴嵴部位表达,髓质部位已经检测不到BMP4的阳性表达,次级毛囊中未发现BMP4在羽轴嵴和羽枝嵴部位阳性表达。而BMP4基因的表达量在40-70日龄呈现突然快速增加的趋势,此段时间片羽分支使羽枝融合,提示了BMP4基因促进片羽的分支,可能促进片羽的羽小枝和羽小钩的发生和发育。90日龄后主要在毛囊毛乳头部位阳性表达,髓质中有极少量的阳性表达,120-130日龄在次级毛囊中基本没有检测到BMP4阳性表达。120日龄时羽毛已经发育成熟,而BMP4的表达量处于较高水平,提示了BMP4在毛囊由静止期向兴盛期转化过程中可能发挥作用。FGF5在胚胎期27天在初级毛囊的毛乳头和基底部髓质部位阳性表达,但在次级毛囊未检测到阳性表达;生后30天,FGF5继续在初级毛囊的基底部髓质部位阳性表达,表达部位逐渐向上延伸,在中间区域的髓质部位也检测到少量阳性表达,而在次级毛囊毛囊乳头部位以及髓质部位检测到弱的阳性表达。60日龄,在初级毛囊未检测到阳性表达,而次级毛囊的髓质部位发现FGF5强阳性表达,90日龄,在毛囊的外根鞘部位检测到有FGF5阳性表达,髓质中有极少量的阳性表达。生后120天时,在初级毛囊的髓质和毛乳头部位检测到有少量的FGF5阳性表达,但在次级毛囊中未检测到FGF5阳性表达。在羽毛快速发育的40-90日龄FGF5表达量快速增加,90日龄时表达量达到峰值,推断FGF5在毛囊发育过程中主要起抑制作用,且主要影响羽毛的长度变化,同时,揭示了FGF5在毛囊由兴盛期到休止期转换期间发挥作用。从BMP4和FGF5两基因表达量变化总体趋势上分析,生后40天之前,两基因表达量变化趋势基本相同,且都处于较低的表达量水平,而这段时期毛囊和羽毛发生发育较为活跃,提示两基因都发挥负调控作用;而在生后40天后两基因表达量开始有所差异,BMP4在羽毛分支时期表达量上升,分支结束表达量下降,并在毛囊进入退行期时表达量上升,揭示了BMP4促进羽毛分支,并与毛囊处于退行期有关;而FGF5在毛囊由兴盛期向退行期转换过程中表达量升高,进入退行期后表达量下降,揭示了FGF5促进毛囊由兴盛期向退行期转化。
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