论文部分内容阅读
胆固醇是具有重要生理作用和工业用途的天然物质,有广泛的市场需求。羊毛脂衍生物羊毛醇中含有大量的游离胆固醇,采用适当的方法将胆固醇从羊毛醇中提取出来具有重要的应用价值。为此,本文对萃取-层析-结晶为核心的高含量胆固醇制备工艺进行了系统研究。针对羊毛醇成分复杂的特点,建立了紫外-示差检测器联用的反相高效液相色谱法对胆固醇和十八醇的含量进行定量分析,建立了气相色谱法对甾醇与脂肪醇等杂质进行定性分析,两种分析方法相结合可以对羊毛醇及分离产物的组成有更全面的了解。开展了液-液萃取法脱除羊毛醇中极性杂质的研究。以十八醇与胆固醇二元混合物为羊毛醇的模拟研究对象,使用正己烷溶解样品,从多种极性萃取剂中初步筛选出选择性较高的甲醇/水混合溶剂为萃取剂；以羊毛醇为研究对象,通过考察水含量、原料浓度和温度等参数对分配系数和萃取选择性的影响,得到优化的工艺条件：萃取剂为甲醇/水(90：10,v/v),温度35～40℃,原料浓度80～100mg/mL,该条件下总杂质对胆固醇的选择性系数高于3。在优化的工艺条件下进行逆流萃取,可有效脱除羊毛醇中极性较强的杂质,将其酸值由3.16降为0.91,同时胆固醇含量提高5-6%。对萃取得到的精制羊毛醇进行了层析分离研究,以胆固醇与羊毛甾醇的分离度为指标,筛选出200～300目硅胶为合适的吸附剂,考察了流动相组成、温度和上载量等因素对层析分离效果的影响,得到优化的工艺条件：流动相为丙酮/正己烷(4：96,v/v)混合溶剂,温度35℃,以胆固醇计适宜上载量为2.4%(wt%)。在优化的工艺条件下可得到含量为88.63%的胆固醇粗品,回收率为96.33%。筛选出丙酮/正己烷(50：50,v/v)混合溶剂为有效的再生溶剂,验证了萃取除杂有利于硅胶的再生,经过7次大上样量层析-再生循环使用后硅胶仍能保持其分离能力不变。最后对溶剂结晶法精制胆固醇工艺进行了研究。考察了溶剂种类、固液比和析晶温度等因素的影响。以无水甲醇为溶剂,固液比为1：20,70℃回流溶解,3h内缓慢冷却至30℃,析晶0.5h,可得到纯度为98.7%,熔程为147.1-147.4℃的胆固醇产品,胆固醇收率为69.4%。