多功能介孔二氧化硅负载ENO1单克隆抗体对宫颈癌的治疗作用研究

来源 :甘肃中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:identitymatrix
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本课题拟制备ENO1单克隆抗体(ENO1mAb),通过多功能介孔二氧化硅纳米颗粒(DMSN)介导ENO1mAb进入细胞质,体外研究ENO1mAb对宫颈癌细胞增殖和迁移的抑制作用,为宫颈癌靶向代谢治疗提供实验室依据。
  方法:1.利用体内诱生法制备ENO1mAb,并用辛酸-硫酸铵法及Protein A层析柱纯化;2.应用油水两相分层法制备树枝状介孔二氧化硅纳米(DMSN)载体,使其负载ENO1mAb,并通过二硫键连接透明质酸(HA);应用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、动态光散射(DLS)、Zeta电位、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)等进行纳米颗粒的表征;3.利用MTT法检测ENO1mAb对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用,用细胞划痕实验检测ENO1mAb对宫颈癌细胞的迁移抑制作用。
  结果:1.成功制备ENO1mAb,并优化纯化条件,最终使用pH7.4,0.02MPB+0.15M NaCl的结合缓冲液,pH3.0,0.1M柠檬酸钠为洗脱液,获得高纯度ENO1mAb;2.成功制备树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒,通过各种表征发现其粒径约100nm,孔径约10nm,均符合实验需求;通过Zeta电位及FT-IR等验证,发现透明质酸成功修饰于树枝状介孔二氧化硅表面,且具有良好的生物相容性;3.当DMSN@ENO1mAb及DMSN-SS-HA@ENO1mAb浓度达到200μg/ml时,Hela细胞相对增殖率分别为53.13±1.547%、44.92±0.678%,与对照组相比均有显著统计学差异;当ENO1mAb与Hela细胞共孵育12h时,游离ENO1mAb、DMSN-SS-HA@ENO1mAb组Hela细胞迁移率分别为:9.765±1.02%、12.40±0.71%,与对照组(19.67±1.71%)相比均有统计学差异,而DMSN@ENO1mAb组细胞迁移率为18.14±1.85%,与对照组相比无统计学差异。
  结论:1.成功制备并纯化ENO1mAb;2.成功制备DMSN,并对其进行透明质酸修饰,可高效负载ENO1mAb;3.多功能介孔二氧化硅负载ENO1mAb可抑制宫颈癌细胞增殖和迁移。
其他文献
学位
期刊
报纸
学位
期刊
学位
期刊
期刊
期刊
报纸