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动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是世界主要发达国家导致人类死亡的心脑血管疾病的主要病理之一。目前认为动脉粥样硬化的发病机理是由于脂质蓄积在血管内皮下。动脉粥样硬化斑块的形成与多种因素有关:血管内皮损伤,单核细胞和巨噬细胞聚集,血管平滑肌细胞增生和多种细胞因子参与调节。其中,单核细胞衍生的巨噬细胞转化成泡沫细胞是动脉粥样硬化发生发展的主要的病理因素。巨噬细胞可以通过不同的胞吞方式摄取各种脂蛋白后转化成泡沫细胞,泡沫细胞的出现是动脉粥样硬化斑块的形成的关键与起始步骤。从而广泛认为泡沫细胞的形成是动脉粥样硬化形成的主要病理。Fatty acid binding proteins(FABPs)是一组同源的小分子量可结合疏水性脂类的细胞内胞浆蛋白,分子量为14-15kD。脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(又称脂肪细胞脂类结合蛋白,adipocyte fatty acidbinding protein,A-FABP,FABP4,aP2)属于细胞内FABP家族成员之一。aP2广泛存在于各种正常组织和细胞中,但主要在脂肪细胞和巨噬细胞中表达。aP2可逆性地结合饱和及不饱和长链脂肪酸,促进脂肪酸的代谢和转运,通过脂质调节基因的表达,并在机体代谢、炎症及免疫等方面具有调节作用。aP2基因敲除的小鼠可以防治高胆固醇食物诱导的动脉粥样硬化的出现,小分子aP2抑制剂能够有效的治疗动脉粥样硬化和Ⅱ型糖尿病。因此,aP2与动脉粥样硬化的发病机理有十分密切的关系。糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)在临床上广泛用于治疗炎症和自身性免疫性疾病。目前常用的两种人工合成糖皮质激素是强比松(prednisolone)和地塞米松(dexamethasone)。地塞米松也是体外诱导成纤维细胞向脂肪细胞转化的主要成分并诱导aP2的表达。他汀类药物(statins)可竞争性抑制胆固醇合成酶系中的限速酶羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的活性从而降低胆固醇在体内的合成,此外,statins还具有减轻炎症反应及稳定、消除动脉粥样硬化斑块等多重作用。文献报道statins可以抑制dexamethasone诱导的脂肪细胞分化。但statins能否拮抗dexamethasone对巨噬细胞aP2表达的诱导作用未见报道。本文通过实验发现,虽然statins抑制巨噬细胞aP2的表达,但却可以协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2的表达。这种协同诱导作用依赖于statins浓度,随着statins浓度升高,协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2的蛋白表达梯度升高。我们还通过Northern检测证明statins协同dexamethasone诱导巨噬细胞aP2的表达是在转录水平上发生。在小鼠腹膜原代巨噬细胞中也得到了相同的结果。之后,我们研究了statins协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2表达的分子机理。胆固醇和甲羟戊酸能够不同程度抑制两种药物的协同作用,而胆固醇合成途径中两种重要的中间产物法尼基焦磷酸和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸并不能抑制两者的协同作用,说明statins协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2的表达与胆固醇的合成途径有关。启动子活性实验表明,statins与dexamethasone的协同作用与糖皮质激素受体有十分重要的关系。通过序列对比分析aP2启动子上游存在糖皮质激素负调节元件(glucocorticoid receptor element,nGRE)与正调节元件(positiveglucocorticoid receptor element, pGRE)。Pitavastatin对糖皮质激素受体的表达没有影响,但增加dexamethasone诱导的糖皮质激素入核反应,并增强与糖皮质激素正调节元件的结合,而抑制受体与负调节元件的结合。由此,statins是通过胆固醇合成途径中的中间产物影响糖皮质激素受体与nGRE和pGRE结合的变化协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2的表达。之后,我们验证statins协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2的表达在生理状态下也存在。野生型小鼠分别喂食含有pitavastatin、dexamethasone和pitavastatin+dexamethasone的食物两周左右后,处死小鼠并收集小鼠腹膜巨噬细胞、脂肪组织和肝脏组织,检测巨噬细胞和脂肪细胞中aP2蛋白的表达变化。结果与体外实验一致,单独喂食dexamethasone后能够一定程度的诱导巨噬细胞与脂肪细胞中aP2蛋白的表达,pitavastatin能够抑制两种细胞中aP2蛋白的表达,两种药物共同喂食后能够显著的诱导巨噬细胞与脂肪细胞中aP2蛋白的表达。同时我们也从志愿者身上获取血液白细胞检测statins和dexamethasone对aP2表达影响。实验结果显示体内实验与体外细胞实验结果一致。同时,为了研究pitavastatin与dexamethasone的协同作用是否对动脉粥样硬化的形成有关,我们分别喂食apoE敲除小鼠含有pitavastatin、dexamethasone和pitavastatin+dexamethasone的高脂食物12周左右,结果显示pitavastatin和dexamethasone双药喂食能够明显加重小鼠主动脉斑块的形成。综上所述,我们的实验首次证实statins协同dexamethasone刺激巨噬细胞aP2的表达,从而有可能出现组合药物使用下副作用的出现,即对动脉粥样硬化促进作用。我们的研究为临床上解决抗炎症/自身免疫抑制疾病和高血脂血症之间的存在关系提供了一定的理论帮助。