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本研究从吉林省某渔场患病的虹鳟幼鱼中分离得到了一株病毒,毒株编号IHNV-1008,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)以及电镜观察的结果,确定该病毒分离株为传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus, IHNV),并对其理化特性、生物特性进行了研究。同时,建立IHNV原核表达系统,表达出IHNV糖蛋白作为免疫原,免疫小鼠制备抗血清,并对其进行效价测定及与全病毒免疫反应等应用。结果如下：本次所分离的病毒株,通过RT-PCR可扩增出特异性条带,进一步对感染该病毒的细胞切片进行电镜观察,在细胞质中可见到大量病毒颗粒,呈典型弹状,直径约为(70～90)nm,长度(150～170)nm。挑斑纯化后,对其特性进行研究,结果显示该病毒能够使EPC、FHM等5种常见水生细胞产生明显细胞病变(Cytopathic effects, CPE),表现为细胞变圆,聚集成葡萄状,形成空斑,最终完全脱离。病毒生长曲线显示产生CPE5d后,病毒达到最大感染滴度,约为106.TCID50/100μ。理化特性试验结果显示该病毒增殖温度为10℃-25℃,最适温度为15℃,不耐热,对脂溶剂和酸敏感,对碱具有较强抗受能力。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,该病毒蛋白条带与IHNV文献记载的相近似。以IHNV感染的细胞悬液为材料,应用RT-PCR方法克隆病毒的糖蛋白基因,并将其亚克隆至原核表达载体pCWori,转化到大肠杆菌DH5α,通过发酵大肠杆菌制备病毒糖蛋白。经SDS-PAGE分析,诱导表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,使用Ni-NTA亲和层析柱在变性条件下进行纯化并透析复性,最终得到了较高纯度的可溶性糖蛋白,分子量约为57KDa。免疫印迹(Western-blot)分析结果显示所表达的蛋白能够被兔抗IHNV血清识别。用复性后的蛋白免疫小鼠制备抗血清,酶联免疫吸附实验(ELISA)显示抗体效价可达1：64000。经制备的抗血清可以作为一抗建立ELISA检测方法,用于检测细胞悬液中的病毒粒子,将抗血清稀释到1：16000仍能与IHNV全病毒发生反应。本试验利用重组的IHNV糖蛋白成功制备了高效价的抗血清,并能够与IHNV全病毒发生特异性结合,为IHNV免疫学检测方法建立奠定了基础。