拟除虫菊酯类农药是一种重要的杀虫剂，但是它对鱼、虾等具有高毒性，并且抗性问题严重。醚型菊酯类农药是近年来农药工作者的研发重点，它们的分子具有醚型结构，秉承了拟除虫菊酯类农药的高效、广谱杀虫性能，并且对鱼等温血动物低毒，农业害虫对其抗性低，在农田施用中具有广泛应用前景。为了保证农产品进出口不受各国最大农药残留量的阻碍，保障消费者的食用安全，必须有行之有效的检测方法对农药残留进行监测。目前主要通过精确、稳定的色谱-串联质谱法进行分析以监控农药使用情况，但该方法成本高、通量低、前处理烦琐，免疫分析方法具有操作简单快速、准确度高、成本低廉的优势，被广泛运用于小分子农兽药残留的大量样本筛查工作。本文针对上述问题及免疫分析技术的优势，开展基于通用结构单克隆抗体的广谱醚型菊酯类农药残留酶联免疫检测技术的研究，主要工作内容如下：1.以2-（4-乙氧基苯基）-2-甲基丙醇为半抗原合成起点，氯乙酸钠亲核取代前者醇羟基的氢原子，引入羧基和2个碳原子长度的连接臂，获得了HaptenⅠ，反应产物纯化后的核磁共振氢谱和碳谱完美的与理论谱图对应。应用活化酯法将半抗原分别与BSA、OVA偶联制备免疫人工抗原（HaptenⅠ-BSA）和包被人工抗原（HaptenⅠ-OVA），并经紫外分光光度分析得其偶联比分别为14:1和35:1。2.将HaptenⅠ-BSA免疫Balb/c小鼠，制备获得了多克隆抗体血清，抗血清效价达到2.56×10⁵，由方阵实验得到最佳抗原包被浓度为1μg/mL，多克隆抗体稀释倍数为1.5×10⁴。以半抗原为研究物的间接竞争ELISA，得到回归方程y=0.1705x+0.59826（R2=0.9922），IC50为265.3ng/mL，IC₁₀为1.2ng/mL。利用PEG4000介导小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合，经过选择培养和有限稀释，成功获得一株阳性杂交瘤细胞，命名为3H6。3.小鼠腹水用辛酸硫酸铵法进行纯化，腹水中单克隆抗体浓度为6.2mg/mL，该方法的回收率为60.4%，抗体亲和常数用Beatty法计算为1.60×10⁷L/mol，经抗体亚类鉴定试剂盒鉴定免疫球蛋白为IgG1亚类，单克隆抗体的效价为5.12×10⁵。包被原的最佳工作浓度为1μg/mL，单克隆抗体稀释倍数为2×10⁴，间接竞争ELISA研究了单克隆抗体对于半抗原的灵敏度，得到回归方程y=0.16682x+0.60615（R²=0.9872），IC₅₀为231.0μg/mL，IC₁₀为0.9ng/mL。对于本研究目标检测的醚菊酯、苄螨醚、三氟醚菊酯、氯醚菊酯、硅醚菊酯等5种醚型菊酯类农药及烃菊酯、氟硅菊酯两种与醚菊酯结构基本相同的新型菊酯类农药，交叉反应表明抗体能够很好的识别，交叉反应率在49.13%⁹2.02%。同时交叉反应表现出抗体对酯型结构的菊酯类农药如氯菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、功夫菊酯、氰戊菊酯等几乎没有响应，交叉反应率小于0.1%。加标回收实验应用单克隆抗体初步建立的间接竞争ELISA方法能够检测出样本基质所加入的目标农药，加标回收率为90.7%。本研究提供的高质量的醚型菊酯通用结构单克隆抗体和初步建立的ELISA快速检测方法，为商品化多残留检测试剂盒和免疫传感器的研制开发打下基础。