β-胡萝卜素生产菌的筛选与发酵

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本文从富油土壤中筛选出几株产β-胡萝卜素菌株,其中一株产β-胡萝卜素能力较强,经形态和生理生化分类实验鉴定为三孢布拉氏霉菌,并优化了利用三孢布拉氏霉菌生产β-胡萝卜素的工艺,主要包括:发酵工艺和提取精制工艺。发酵工艺从营养性条件如碳源、氮源、磷源、无机盐,发酵促进剂如表面活性剂、氧化剂等方面优化三孢布拉氏霉摇瓶发酵条件。研究结果表明,其最佳培养基组分为:可溶淀粉4%、玉米浆粉3%、豆油4%、MgSO40.2%、Tween-800.8%、H2O230μmol·L-1。采用先皂化纯化后超声的提取工艺。使用正交试验优化了皂化法初步纯化工艺。结果表明:NaOH浓度为0.5mol·mL-1、物料比为1:8(g:mL)、皂化温度35℃、皂化时间45min、可去除大部分脂肪酸和甘油酯;各因素对β-胡萝卜素的提取率影响的显著性从大到小依次为:NaOH用量、皂化温度、皂化时间。研究了从三孢布拉霉中提取β-胡萝卜素最优工艺,采用正交试验优化了超声法提取三孢布拉霉中β-胡萝卜素的工艺条件。最佳工艺条件:溶剂为乙酸乙酯、超声功率100W、浸提温度35℃、浸提时间45min。同时使用抗氧化剂VE和VC棕榈酸酯,β-胡萝卜素提取率提高4.2%,浸提级数为3。上述条件下,β-胡萝卜素的提取率最高可达到92.2%。
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