用gusA和celB基因检测慢生花生根瘤菌竞争性的可行性研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:teruiandi
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本试验采用大肠杆菌和根瘤菌接合的方法,将gusA和celB两种标记基因分别导入了三株慢生型花生根瘤菌Spr3-5,Spr3-7和Spr4-5中,检测结果表明,gusA和celB基因在三株慢生型花生根瘤菌Spr3-5,Spr3-7和Spr4-5中可以有效表达。 利用标记基因进行生态学研究,首先要考虑到标记基因对受体菌的影响,对出发菌株和标记菌株的代时测定结果表明,二者之间没有显著差异,说明导入标记基因的菌株其生长速率没有发生改变。 通过水培试验研究了标记基因对受体菌株的竞争结瘤能力和固氮有效性的影响。在标记菌株与出发菌株等量接种的前提下,比较了二者的竞争结瘤能力,结果显示,标记菌株形成的根瘤(蓝瘤)的占瘤率与50%相比差异不显著,说明标记菌的竞争结瘤能力与出发菌株相比没有发生显著改变。 为了研究标记菌株与出发菌株的固氮有效性,测定了标记菌株与出发菌株各自共生植株的干重、全氮和叶绿素含量,结果表明,标记菌株与出发菌株的这三项指标之间没有显著差异,从不同角度说明标记后的三株慢生型花生根瘤菌和出发菌株相比,其固氮有效性并未发生显著改变,而且它们之间的相关系数分别为0.864(P<0.01),0.809(P<0.01),0.854(P<0.01),说明用这三个指标来指示慢生型花生根瘤菌的固氮有效性是可靠的。 通过盆栽试验研究了标记菌与土著菌的竞争结瘤试验,结果表明本试验所采用的三个菌株与土著菌相比有更高的竞争结瘤能力,其固氮有效性也较高。同时证明利用gusA和celB基因研究根瘤菌的竞争结瘤能力是简单可行的方法,可以较为直观的对标记菌形成的根瘤进行检测。当然,从检测所需费用来看,celB基因标记法成本更低一些。
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