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第一部分 PLB基因反义RNA腺相关病毒载体的构建及其对培养的大鼠心肌细胞的作用 【目的】 构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体(rAAv-asPLB),探讨其对培养的大鼠心肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase活性和胞浆内钙离子浓度([Ca2+]i)的作用,为进一步的动物实验提供基础。 【方法】 1、rAAV-asPLB和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体(rAAV-LacZ)的构建:质粒辅助重组腺相关病毒系统(AAV Helper-Free System)包括腺相关病毒结构质粒pAAV-MCS、携带腺相关病毒rep-cap基因的质粒pAAV-RC、辅助质粒pHelper、携带LacZ报告基因的质粒pAAV-LacZ。提取大鼠心肌总RNA,