乙肝病毒三种基因型转染细胞系在药物实验中的应用

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xujin2003cn
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目的本研究旨在建立乙肝病毒(hepatitis B virus, HBV)I基因型复制的细胞模型,以期为抗病毒治疗提供一定的实验依据。同时通过研究中国周边国家的HBV的基因型和亚型分布特点,了解相关的研究进展。方法1.构建B、C、I三种基因型1.2倍真核表达载体并转染HepG2 (Human hepatocellular liver carcinoma cell line2)细胞系。2.研究干扰素alb及四种天然化合物对HepG2细胞系和HBV表达的影响。3.从美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)数据库中收集中国周边14个国家的乙型肝炎病毒全基因组序列信息,对其中所有的B基因型序列进行分析比对。结果1.三种基因型瞬时转染HepG2细胞后均能表达HBsAg。2.干扰素alb浓度高于6000U/mL时对I1/C1重组型HBV的表面抗原有显著抑制,HepG2细胞系仅对化合物D较敏感。对于H75-B3而言,只在6小时左右加入了化合物A和D的组对病毒的活性有一定的抑制作用。对于Y17-C1,加入了化合物A、B和D的组病毒的活性有一定的抑制。3.中国周边国家乙肝病毒基因型以B、C、D三种为主,血清型则以adw2和adrq+两种为主。B3、B5、B7、B8、B9五种亚型间序列差异度<4%,且它们在S区有六个共同的氨基酸特异性位点。结论本研究成功构建三种HBV基因型1.2倍真核表达载体。高浓度α1b对I1/C1重组型有抑制作用。B3、B5、B7、B8、B9五种亚型可合并为准基因亚型B3。
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