背景及目的:人类试图用化学药物治疗癌症由来己久,而从60年代以后,才真正地建立起了比较完善的研究和使用体系。目前有不少癌症可以通过化学药物治愈,而肿瘤的治疗是一种综合治疗,所以要将肿瘤的治疗学掌握好、应用好需要更多方面的知识和经验。随着肿瘤治疗研究的发展,肿瘤临床治疗的方法也日趋多样化。术中腹腔温热化疗IPHC(新辅助疗法)是八十年代才发展起来的一种治疗肿瘤的新方法,是腹腔化疗与局部热疗相结合的一种外科减瘤术后的局部辅助疗法,在杀灭腹腔内游离的肿瘤细胞和微小癌转移灶,预防肿瘤复发,提高术后生存率等方面优于传统疗法。然而,术中腹腔温热化疗在对肿瘤细胞产生细胞毒作用的同时,也会对正常细胞产生细胞毒作用,这种作用在吻合口部位表现的更为明显。众所周知,新生血管对伤后愈合起着至关重要的作用,本课题旨在通过研究运用丝裂霉素行术中腹腔温热化疗对Wistar大鼠结肠肠吻合口新生血管生成的影响及机制,以此来探讨术中腹腔温热化疗的安全性和可行性。方法:健康大鼠54只行左半结肠离断,断端端端吻合术后随机分为3组,每组18只,处置如下:A:37℃常温灌注组(IPNP组);B:43℃温热灌注组(IPHP组);C:43℃温热化疗组(IPHC组),化疗药物为丝裂霉素8mg/L。分别于术后第1,3,5,7,14,28天切取吻合口周围结肠,行HE及VEGF免疫组化染色、MVD计数、RT-PCR法检测血管内皮生长因子mRNA的相对表达量;采用单因素方差分析及Pearson相关分析处理实验数据,P <0.05认为有显著性差异。结果:1.HE染色病理观察示常温组于术后1天新生毛细血管即见增多,3天毛细血管明显增多,术后5天毛细血管数量达高峰,7-28天逐渐减少、闭合、退化,温热组变化与常温组变化趋于一致。温热化疗组于术后5天始见增多,14天达高峰,术后28天基本趋于基线水平。2.免疫组化染色病理观察示VEGF蛋白在正常结肠吻合口周围的血管内皮细胞、成纤维细胞和部分炎细胞胞浆内呈弱阳性表达。常温组血管内皮细胞胞浆VEGF蛋白表达在伤后第1天呈阳性,伤后5天成强阳性,而于伤后7天阳性程度逐渐减弱,温热组与常温组变化趋于一致。与上述两组相比,温热化疗组血管内皮细胞胞浆VEGF蛋白表达在伤后3天部分成阳性、部分成弱阳性,伤后5、7天成强阳性,伤后14天成阳性,28天于血管内皮细胞胞浆内呈弱阳性。3.常温组与温热组动物微血管密度(MVD)随时间变化趋势基本趋于一致,均于术后1天即明显增多,5天达峰值并维持在较高水平,7天开始逐渐减少,28天降至较低水平。温热化疗组MVD变化趋于平缓,术后早期计数变化不显著,3天后逐渐升高,术后第14天达高峰,随即减少,28天降至较低水平。温热组与常温组比较MVD仅于第1天存在显著差异,其它各时间段均无显著差异。温热化疗组与常温组比较除第7、28天外各时间段均存在显著差异。4.各实验组VEGF-mRNA相对表达量与MVD呈平行变化。随MVD的增加,VEGF-mRNA相对表达量亦增高。经单因素方差分析温热组与常温组比较VEGF-mRNA相对表达量仅于术后第1天存在显著差异,其它各时间段均无显著差异。温热化疗与常温组比较除第7、28天外各时间段均存在显著差异。经Pearson相关分析,VEGF表达强度与MVD间有显著相关性(r1=0.92 p1<0.01, r2=0.97 p2<0.01, r3=0.94 p3<0.01 )。结论:1.温热效应对结肠吻合口新生血管生成存有不利影响,但此影响仅局限于术后早期。温热效应联合使用MMC行IPHC对新生血管生成的影响明显,其协同的影响作用表现的显著而持久。2.术后第7天各组实验动物吻合口周围新生血管均增值到一较高水平,且无统计学差异,可被认为是吻合口愈合的关键时期。3.VEGF对血管内皮细胞有特异的促有丝分裂作用,是有效的内源性大鼠结肠血管生长因子。在结肠吻合术后,VEGF与结肠吻合口新生血管生成有时间上的相关性,并在其中发挥重要作用。4.温热效应联合使用MMC行IPHC在分子水平上即影响了VEGF的转录及表达,以此进一步抑制了新生血管的生成。