侧孢芽孢杆菌BL-21降解有机磷农药作用的研究

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本试验研究了侧孢芽孢杆菌菌株BL-21降解有机磷农药的特性、降解条件、降解酶的细胞分布和初步分离纯化、降解农药的特性与质粒关系及水胺硫磷的代谢途径。 菌株BL-21降解有机磷农药特性的研究结果表明,该菌株对有机磷农药的降解具有广谱性,尤其是能较好地降解水胺硫磷,降解率达40%-50%。该菌株能够耐受5mg/L的水胺硫磷,降解水胺硫磷的过程呈现动态变化,并且与菌体的生长趋势有一定的相关性。 该菌株降解水胺硫磷的最佳培养基配方为:蔗糖1.5%,NH4HCO30.06%,NaCl、KCl、MgSO4均为0.03%,FeSO4.7H2O、MnSO4.4H2O均为0.003%。最佳降解条件为:250 mL三角瓶装量30mL、pH7、培养温度30℃、200r/min。添加适量的TritonX-100能够增强菌株BL-21的降解能力,金属离子对水胺硫磷的降解率没有影响。 菌株BL-21的有机磷农药降解酶为组成型胞内酶,酶的分子量大小为28KD,酶活为0.305U。对菌株BL-21质粒研究的结果表明,菌株降解有机磷农药的特性与质粒无关,是由基因组控制的。 用气质联机对水胺硫磷降解产物的分析表明,菌株BL-21降解水胺硫磷产生0,0′-二甲氧基硫代磷酰胺酯和水杨酸异丙酯等中间产物,0,0′-二甲氧基硫代磷酰胺酯可进一步分解成无机磷、硫化物、氨气等产物;水杨酸异丙酯降解为水杨酰胺、水杨酸及其它有机酸,进一步降解为二氧化碳和水,毒性显著降低。 添加中间产物的研究结果表明,0.02%-0.08%的水杨酸促进了水胺硫磷的降解,琥珀酸和乙酸对水胺硫磷的降解没有明显影响。
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